Standar Diagnosis Laboratorium Penyakit Ornithosis

Dalam upaya memperkuat sistem surveilans dan respons terhadap penyakit zoonosis, Jaringan Laboratorium Kesehatan Masyarakat (Public Health Laboratory Network/PHLN) di Australia telah menyusun definisi kasus standar untuk berbagai penyakit penting yang berdampak pada kesehatan manusia dan hewan. Salah satu fokus utamanya adalah penyakit yang disebabkan oleh Chlamydophila psittaci, bakteri yang menjadi agen penyebab psittacosis (ornithosis) — infeksi yang dapat menular dari burung ke manusia. Dokumen panduan ini memberikan standar diagnosis laboratorium yang seragam dan terukur, sehingga hasil pemeriksaan dari berbagai laboratorium di seluruh Australia dapat dibandingkan dan diinterpretasikan secara konsisten, mendukung upaya deteksi dini dan pengendalian penyakit secara nasional.

 

1. RINGKASAN PHLN DEFINISI LABORATORIUM

 

1.1 Kondisi

Psittacosis atau Ornithosis

 

1.2.1 Kriteria Laboratorium Definitif

• Isolasi Chlamydophila psittaci dari spesimen pernapasan (misalnya, sputum, BAL, cairan pleura, atau jaringan paru), ATAU

• Deteksi DNA C. psittaci dalam spesimen pernapasan (misalnya, sputum, BAL, cairan pleura, atau jaringan paru) melalui uji polymerase chain reaction (PCR), ATAU

• Peningkatan empat kali lipat atau lebih dalam antibodi (Immunoglobulin G [IgG]) terhadap C. psittaci yang ditunjukkan melalui uji mikro-imunofluoresensi (MIF) atau uji fiksasi komplemen (CF) antara serum fase akut dan fase penyembuhan yang diambil setidaknya 2 minggu terpisah pada individu berusia lebih dari 5 tahun dengan penyakit yang sesuai secara klinis.

• Titer antibodi tunggal yang tinggi terhadap C. psittaci yang ditunjukkan melalui uji MIF, EIA, atau CF dalam spesimen serum yang diambil setelah timbulnya gejala pada individu berusia lebih dari 5 tahun dengan penyakit yang sesuai secara klinis.

 

1.2.2 Kriteria Pendukung

 

2. PENDAHULUAN

 

2.1 Organisme

Psittacosis (juga dikenal sebagai penyakit burung beo, demam burung beo, dan ornithosis) adalah penyakit zoonosis yang disebabkan oleh bakteri intraseluler wajib Chlamydophila psittaci (Chlamydia psittaci sebelum 1999).[1] Spesies ini mencakup enam serovar burung, yang diberi kode A hingga F, dan dua strain mamalia (M56 dan WC).2 Genom C. psittaci yang telah diurutkan memiliki satu kromosom sekitar 1,1 Mb dan plasmid konservatif ~8 Kb yang mengandung 7-8 urutan pengkode protein. Genotipe ompA yang diterima saat ini (A-F, E/B, M56, dan WC) sebagian besar sesuai dengan serovar dan dibedakan melalui penentuan urutan gen atau PCR spesifik genotipe. Genotipe A dan B dikaitkan dengan burung psittacine dan merpati, masing-masing. Genotipe C terutama diisolasi dari bebek dan angsa, sedangkan genotipe D terutama ditemukan pada kalkun. Genotipe F dikaitkan dengan infeksi pada kalkun dan burung psittacine. Rentang inang dari genotipe E paling beragam (misalnya, merpati, bebek, kalkun). WC dan M56 endemik pada sapi dan tikus muskrat.[2] Bakteri C. psittaci mudah rusak oleh panas dan mati pada suhu 56°C selama 30 menit. Mereka juga mati oleh desinfektan umum; namun, mereka dapat bertahan dalam kondisi kering selama beberapa bulan.

 

2.2 Penyakit

Chlamydia (atau Chlamydophila) menyebabkan penyakit oculogenital (C. trachomatis) atau infeksi pernapasan dan sistemik (C. pneumoniae dan C. psittaci). Klamidiosis burung mengacu pada penyakit yang disebabkan oleh C. psittaci pada burung. Infeksi ini dapat terjadi pada setidaknya 460 spesies burung, mencakup 30 ordo burung yang berbeda. Tingkat keparahan penyakit pada burung dapat bervariasi dari ringan hingga fatal. Burung yang terinfeksi mungkin menunjukkan gejala seperti lesu, anoreksia, bulu kusut, keluaran mata/hidung, dan diare. Pengobatan antibiotik tersedia untuk burung yang terinfeksi, namun membutuhkan waktu lama (minimal 7 minggu dengan suntikan mingguan atau pengobatan oral) dan mungkin tidak efektif jika organisme berada dalam fase dorman. Burung juga tidak mengembangkan kekebalan pelindung dan, akibatnya, dapat terinfeksi kembali. C. psittaci juga dapat menginfeksi mamalia seperti domba, kambing, dan sapi, menyebabkan infeksi kronis pada saluran reproduksi, insufisiensi plasenta, dan aborsi pada hewan-hewan ini.[3]

 

Infeksi pada manusia biasanya menunjukkan gejala mirip flu, seperti demam, menggigil, sakit kepala, nyeri otot, dan batuk kering. Sesak napas dan sesak dada sering menyertai batuk kering, dan splenomegali serta ruam dapat terjadi. Masa inkubasi biasanya 5-14 hari, meskipun ada laporan hingga satu bulan.[3] Tingkat keparahan infeksi dapat bervariasi dari penyakit tanpa gejala hingga penyakit sistemik dengan pneumonia berat.[4,5] Tingkat kematian 15-30% dilaporkan pada era sebelum antibiotik, meskipun penyakit ini jarang berakibat fatal saat ini. Hasil rontgen dada menunjukkan infiltrat lobar atau interstisial.

 

Diagnosis banding psittacosis mencakup pneumonia akibat infeksi atipikal lainnya seperti Coxiella burnetti, agen penyebab demam Q, Mycoplasma pneumoniae, Chlamydia pneumoniae, spesies Legionella, atau virus pernapasan seperti virus influenza manusia. C. psittaci juga telah dilaporkan menyebabkan infeksi pada sistem organ lain, termasuk endokarditis, miokarditis, hepatitis, artritis, keratokonjungtivitis, dan ensefalitis. Penyakit parah, termasuk kematian janin, telah dilaporkan ketika infeksi terjadi selama kehamilan.[5-8]

 

2.3 Penularan

Chlamydia psittaci dapat ditularkan kepada orang-orang yang terpapar cairan kelahiran dan plasenta dari hewan yang terinfeksi. Penularan dari manusia ke manusia telah disarankan, namun belum terbukti.[9] Infeksi C. psittaci pada manusia biasanya terjadi melalui inhalasi organisme yang ter aerosol dari kotoran kering atau sekresi pernapasan, yang dapat terjadi melalui kontak mulut-ke-paruh atau dari menangani burung yang terinfeksi. Burung peliharaan seperti burung beo, parkit, macaw, cockatiel, serta unggas seperti kalkun dan bebek paling sering terlibat dalam penularan kepada manusia.[1,3] Burung yang terinfeksi mengeluarkan bakteri melalui kotoran dan sekresi hidung, yang dapat tetap menular selama beberapa bulan. Infeksi dapat terjadi setelah paparan singkat, sehingga pasien mungkin tidak selalu ingat adanya kontak pasti dengan burung. [1,3,10,11] Dokter hewan, peternak burung, dan penjaga toko hewan berisiko khusus. Selain itu, aktivitas seperti berkebun dan memindahkan atau memangkas rumput tanpa alat penangkap rumput juga telah dikaitkan dengan psittacosis pada manusia. [12]

 

3 DIAGNOSIS LABORATORIUM / TES

 

3.1 Kultur Bakteri

C. psittaci dapat diisolasi menggunakan metode kultur sel, meskipun prosedur ini tidak digunakan untuk tujuan diagnostik rutin dan hanya dilakukan di laboratorium referensi. C. psittaci adalah patogen dengan Tingkat Biosafety 3, dan penularan organisme dari spesimen pasien atau kultur sel yang terinfeksi dapat terjadi melalui aerosol atau percikan ke membran mukosa. Kultur, jika diperlukan, memakan waktu dan hanya dilakukan di laboratorium dengan fasilitas penahanan fisik tingkat 3.

 

3.1.1 Spesimen yang Sesuai

Spesimen pernapasan seperti bronkoalveolar lavage dan sputum adalah spesimen yang sesuai untuk kultur C. psittaci.

3.1.2 Media

Beberapa lini sel dapat digunakan untuk mengisolasi klamidia dari spesimen klinis, termasuk McCoy, HeLa 229, Hep-2, BGMK, Vero, dan sel L. Kultur diinkubasi selama 48-72 jam di bawah pengaruh penghambat sintesis protein sel inang, sikloheksimid. Kultur positif dikonfirmasi melalui kehadiran inklusi intrasitoplasma khas yang terlihat setelah imunostaining.[8]

 

3.1.3 Sensitivitas dan Spesifisitas Tes

Tidak ada data yang tersedia tentang sensitivitas dan spesifisitas kultur karena jarang dilakukan sebagai bagian dari diagnosis rutin, dan tidak ada uji yang dianggap sebagai 'standar emas' untuk diagnosis psittacosis. Penggunaan C. psittaci 6BC (ATCC VR-125, isolat burung) dan strain Orni (isolat manusia) sebagai kontrol dianjurkan.

 

3.2 Serologi

Serologi tetap menjadi metode utama untuk diagnosis infeksi C. psittaci, namun metode ini dapat rentan terhadap hasil positif palsu dan negatif palsu. Antigen yang terletak di permukaan, seperti lipopolisakarida klamidia, dapat bereaksi silang dengan antibodi terhadap bakteri lain. Pengobatan tepat waktu dengan antibiotik yang sesuai mungkin menghambat perkembangan antibodi yang dapat dideteksi. Format serologi yang paling umum digunakan termasuk enzim immunosorbent assay rekombinan (rELISA), uji fiksasi komplemen (CFT), dan uji mikroimunofluoresensi (MIF) untuk mendeteksi antibodi imunoglobulin M (IgM), IgG, dan IgA dengan spesifisitas keluarga, serotipe, atau spesies. Sampel serologi akut dan konvalesen berpasangan yang diambil dengan jarak 10-14 hari lebih disukai untuk diagnosis.

 

3.2.1 ELISA Rekombinan

ELISA rekombinan bersifat reaktif pada genus dan menawarkan keuntungan berupa otomatisasi dan objektivitas untuk menyaring semua permintaan terkait infeksi pernapasan akibat klamidia (C. pneumoniae dan C. psittaci). Kit rELISA menggunakan lipopolisakarida rekombinan murni. Antibodi anti-LPS biasanya berkembang cepat setelah timbulnya infeksi, sedangkan respons MIF sering tertunda. Uji serologi untuk IgG dan IgA spesifik Chlamydia sering digunakan untuk menyaring spesimen sebelum pengujian MIF yang lebih rumit. Kehadiran IgG dengan IgA negatif menunjukkan infeksi masa lalu, sedangkan kehadiran IgG dan IgA atau IgA tunggal kemungkinan besar menunjukkan infeksi baru atau positif palsu IgA; pengujian ulang disarankan 10-14 hari kemudian untuk menunjukkan serokonversi IgG atau peningkatan titer IgG.

 

3.2.2 Uji Fiksasi Komplemen (CFT)

Uji fiksasi komplemen dapat digunakan untuk diagnosis serologi psittacosis. Uji ini didasarkan pada reaktivitas antibodi terhadap antigen LPS klamidia yang umum pada semua anggota Chlamydiaceae. Reaksi silang dapat terjadi dengan anggota Chlamydiaceae lainnya, dan titer di atas 1:16 dapat diartikan sebagai bukti infeksi klamidia masa lalu atau terkini.

 

3.2.3 Uji Mikroimunofluoresensi (MIF)

Uji mikroimunofluoresensi dianggap sebagai metode pilihan untuk langkah konfirmasi diagnosis serologi infeksi klamidia. Respons antibodi spesifik spesies dan serovar dapat dideteksi dengan metode ini. Bentuk elementer murni (EB) dari strain perwakilan C. psittaci ditempelkan dalam pola tertentu pada kaca preparat. Enceran seri serum pasien ditempatkan di atas titik antigen tetap dan diinkubasi, dan antibodi yang terikat dideteksi dengan antibodi anti-IgG atau anti-IgM yang berkonjugasi fluorescein. Format uji MIF secara teknis menuntut, memakan waktu, dan mungkin kurang cocok untuk pengujian volume tinggi. Titer tunggal lebih dari 32 atau peningkatan titer empat kali lipat antara spesimen akut dan konvalesen menunjukkan infeksi akut. Kinerja uji ini bergantung pada beberapa faktor, termasuk persiapan antigen yang digunakan dan pengalaman orang yang membaca uji tersebut.[8]

 

3.2.4 Jaminan Kualitas

Laboratorium yang melakukan serologi klamidia berpartisipasi dalam Program Jaminan Kualitas yang diselenggarakan oleh Royal College of Pathologists of Australasia.

 

3.2.5 Sensitivitas dan Spesifisitas Uji

Tidak ada data yang tersedia mengenai sensitivitas dan spesifisitas serologi, karena tidak ada satu uji pun yang dianggap sebagai 'standar emas' untuk diagnosis psittacosis.

 

3.3 Uji Amplifikasi Asam Nukleat (NAAT)

Karena keterbatasan spesifisitas pengujian serologi akibat tingginya prevalensi infeksi C. pneumoniae pada manusia, pengujian berbasis amplifikasi asam nukleat yang menargetkan genetik berbeda, seperti gen ompA, telah dikembangkan.

 

3.3.1 Spesimen yang Sesuai

Spesimen yang paling sering digunakan untuk NAAT adalah sputum, usapan tenggorokan, dan lavage bronkoalveolar. Darah, urin, cairan serebrospinal (CSF), dan kadang-kadang spesimen lingkungan juga dapat digunakan.

 

3.3.2 Prosedur

NAAT dengan menggunakan urutan spesifik genus dan spesifik spesies dapat digunakan untuk mendeteksi genus Chlamydia dan mengidentifikasi spesies menjadi C. pneumoniae dan C. psittaci. NAAT ini didasarkan pada gen MOMP (protein membran luar utama) dan gen 23S rRNA untuk genus, serta gen IncA dan wilayah interspaser 16-23S rRNA untuk spesies C. psittaci. Langkah kedua PCR bersifat spesifik untuk spesies dan membedakan antara spesies Chlamydia yang berbeda. Amplicon dideteksi menggunakan SYBR green dan analisis kurva leleh, serta dikonfirmasi dengan elektroforesis gel.[8,13]

 

3.3.3 Sensitivitas dan Spesifisitas Uji

Tidak ada data yang tersedia mengenai sensitivitas dan spesifisitas serologi, karena tidak ada satu uji pun yang dianggap sebagai 'standar emas' untuk diagnosis psittacosis.

 

3.4 Subtipe Strain

Kesamaan C. psittaci dapat dinilai dengan menggunakan polimorfisme panjang fragmen restriksi dari gen ompA pada isolat atau amplicon PCR. Analisis VNTR (Variable Number of Tandem Repeats) pada beberapa lokus (MLVA) berdasarkan deteksi polimorfisme tandem dari delapan lokus telah dijelaskan.[14] Analisis MLVA dapat dilakukan langsung pada DNA yang diekstraksi dari spesimen klinis, namun daya diskriminasi antarstrain pada pengetikan molekuler C. psittaci belum sepenuhnya dipahami.

 

4. KONSEP SNOMED CT

 

Tabel berikut menyajikan konsep-konsep yang relevan dalam SNOMED CT (Systematized Nomenclature of Medicine – Clinical Terms) yang berkaitan dengan psittacosis (ornithosis) dan Chlamydophila psittaci. SNOMED CT merupakan sistem terminologi medis terstruktur yang digunakan secara internasional untuk standarisasi istilah klinis, sehingga mempermudah pertukaran dan analisis data kesehatan. Setiap entri dalam tabel memiliki kode unik yang merepresentasikan suatu konsep klinis, organisme penyebab, maupun prosedur diagnostik yang terkait dengan infeksi Chlamydophila psittaci, seperti kultur, uji serologi, dan analisis PCR.

 

Konsep SNOMED CT	Kode
Psittacosis/ornithosis (disorder)	75116005
Chlamydophila psittaci (organism)	14590003
Chlamydia psittaci culture (procedure)	122401005
Polymerase chain reaction analysis (procedure)	9718006
Chlamydia group complement fixation test (procedure)	315095005
Chlamydia psittaci IgG level (procedure)	134254001
Chlamydia psittaci IgA level (procedure)	395194001
Chlamydia psittaci IgM level (procedure)	134255000
Chlamydia psittaci antibody level (procedure)	315098007
Microbial antibody titer by immunofluorescence method (procedure)	104261003
Polymerase chain reaction analysis for genomic fingerprinting (procedure)	252370006

 

5. REFERENSI

 

1. Centers for Disease Control and Prevention. National Notifiable Diseases Surveillance System (NNDSS). Psittacosis/Ornithosis (Chlamydophila psittaci) 2010 Case Definition.

2. Beeckman DSA, Vanrompay DCG. Zoonotic Chlamydophila psittaci infections from a clinical perspective. Clin Microbiol Infect 2009;15:11-17.

3. Raso TF, Ferreira V L, Timm LN, Abreu FTM. Psittacosis domiciliary outbreak associated with monk parakeets (Myiopsitta monachus) in Brazil: need for surveillance and control. Journal of Medical Microbiology case reports 2014 doi: Microbiology Society

4. Branley JM, Weston KM, England J, Dwyer DE, Sorrell T. C. Clinical features of endemic community-acquired psittacosis. New Microbes and New Infections 2014;2 (1):7-12.

5. Pandeli V, Ernest D. A case of fulminant psittacosis. Crit Care Resusc 2006; 8: 40-42.

6. Birkhead JS, Apostolov K. Endocarditis caused by psittacosis agent. British Heart Journal 1974; 36: 728-731.

7. Cowie J, Chidley K, Hughes P. Neurological complications in psittacosis: a case report and literature review. Respiratory Medicine 1995; 89(9):637-38.

8. Jorgensen JH, Pfaller MA, Carroll KC, Funke G, Landry ML, Richter SS et al. Manual of Clinical Microbiology, 11th Edition, ASM Press, Washington, D.C.

9. Wallensten A, Fredlund H, Runehagen A. Multiple human-to-human transmission from a severe case of psittacosis, Sweden, January–February 2013. Euro Surveill 2014;19(42).

10. Telfer BL, Moberley SA, Hort KP, Branley JM, Dwyer DE, Muscatello DJ et al. Probable psittacosis outbreak linked to wild birds. Emerg Infect Dis 2005; 11(3): 391–397.

11. Rehn M, Ringberg H, Runehagen A, Herrmann B, Olsen B, Petersson AC et al. Unusual increase of psittacosis in southern Sweden linked to wild bird exposure, January to April 2013. Euro Surveill 2013;18(19).

12. Williams J, Tallis G, Dalton C, et al. Community outbreak of psittacosis in a rural Australian town. Lancet 1998;351:1697-99.

13. Schuller M, Sloots TP, James GS, Halliday CL, Carter IJW. In: PCR for Clinical Microbiology. An Australian and International Perspective. Springer, 2010.

14. Laroucau K, Thierry S, Vorimore F, Blanco K, et al. High resolution typing of Chlamydophila psittaci by multilocus VNTR analysis (MLVA). Infect Genet Evol 2008;8:171-81.

 

SUMBER:

Ornithosis or psittacosis (Chlamydophila psittaci), Laboratory case definition. Public Health Laboratory Network/PHLN. Australia.

https://www.health.gov.au/sites/default/files/documents/2022/06/ornithosis-or-psittacosis-laboratory-case-definition.pdf