Geger! Kucing Ternyata Bisa Terinfeksi Corona — Tapi Anjing Hampir Tidak Terpengaruh!

Coronavirus dapat menginfeksi kucing - anjing, tidak terlalu banyak

 

Tetapi para ilmuwan mengatakan tidak jelas apakah kucing dapat menyebarkan virus ke manusia, jadi pemilik hewan peliharaan belum perlu panik.

Sebuah penelitian menemukan kucing rentan terhadap virus corona, tetapi tidak jelas apakah mereka dapat menginfeksi orang

Kucing dapat terinfeksi dengan coronavirus yang menyebabkan COVID-19, dan dapat menyebarkannya ke kucing lain, tetapi anjing tidak terlalu rentan terhadap infeksi, kata para peneliti di Cina. Tim itu, di Harbin Veterinary Research Institute, juga menyimpulkan bahwa ayam, babi, dan bebek tidak mungkin tertular virus.

Ilmuwan lain mengatakan temuan itu menarik, tetapi pemilik kucing tidak perlu khawatir dulu. Hasilnya didasarkan pada percobaan laboratorium di mana sejumlah kecil hewan secara sengaja diberi dosis tinggi virus, SARS-CoV-2, dan tidak mewakili interaksi kehidupan nyata antara manusia dan hewan peliharaan mereka, kata ahli virus Linda Saif di Ohio. Universitas Negeri di Wooster. Tidak ada bukti langsung bahwa kucing yang terinfeksi mengeluarkan cukup koronavirus untuk menularkannya kepada orang-orang, katanya.

Patroli hewan peliharaan

Dengan coronavirus yang menyebar dengan cepat di seluruh dunia, beberapa orang telah mengangkat kekhawatiran tentang apakah itu dapat menular antara hewan peliharaan dan manusia. Sejauh ini, ada beberapa laporan tentang hewan peliharaan yang terinfeksi: seekor kucing di Belgia dan dua anjing di Hong Kong. "Kucing dan anjing berada dalam kontak dekat dengan manusia, dan oleh karena itu penting untuk memahami kerentanan mereka terhadap SARS-CoV-2 untuk kontrol COVID-19," tulis para penulis studi terbaru ¹ , sebuah cetakan yang diposting di bioRxiv pada tanggal 31 Maret , yang belum ditinjau oleh rekan sejawat.

Tim yang dipimpin oleh ahli virologi Bu Zhigao, memperkenalkan sampel virus SARS-CoV-2 ke dalam hidung lima kucing domestik. Ketika dua dari hewan itu di-eutanasia

Sebuah penelitian menemukan kucing rentan terhadap virus corona, tetapi tidak jelas apakah mereka dapat menginfeksi orang. Kredit: Manan Vatsyayana / AFP / Getty

Kucing dapat terinfeksi dengan coronavirus yang menyebabkan COVID-19, dan dapat menyebarkannya ke kucing lain, tetapi anjing tidak terlalu rentan terhadap infeksi, kata para peneliti di Cina. Tim itu, di Harbin Veterinary Research Institute, juga menyimpulkan bahwa ayam, babi, dan bebek tidak mungkin tertular virus.

Ilmuwan lain mengatakan temuan itu menarik, tetapi pemilik kucing tidak perlu khawatir dulu. Hasilnya didasarkan pada percobaan laboratorium di mana sejumlah kecil hewan secara sengaja diberi dosis tinggi virus, SARS-CoV-2, dan tidak mewakili interaksi kehidupan nyata antara manusia dan hewan peliharaan mereka, kata ahli virus Linda Saif di Ohio. Universitas Negeri di Wooster. Tidak ada bukti langsung bahwa kucing yang terinfeksi mengeluarkan cukup koronavirus untuk menularkannya kepada orang-orang, katanya.

Misteri memperdalam sumber hewan coronavirus

Patroli hewan peliharaan

Dengan coronavirus yang menyebar dengan cepat di seluruh dunia, beberapa orang telah mengangkat kekhawatiran tentang apakah itu dapat menular antara hewan peliharaan dan manusia. Sejauh ini, ada beberapa laporan tentang hewan peliharaan yang terinfeksi: seekor kucing di Belgia dan dua anjing di Hong Kong. "Kucing dan anjing berada dalam kontak dekat dengan manusia, dan oleh karena itu penting untuk memahami kerentanan mereka terhadap SARS-CoV-2 untuk kontrol COVID-19," tulis para penulis studi terbaru ¹ , sebuah cetakan yang diposting di bioRxiv pada tanggal 31 Maret , yang belum ditinjau oleh rekan sejawat.

Tim yang dipimpin oleh ahli virologi Bu Zhigao, memperkenalkan sampel virus SARS-CoV-2 ke dalam hidung lima kucing domestik. Ketika dua dari hewan itu di-eutanasia enam hari kemudian, para peneliti menemukan viral load, juga partikel virus yang menular, di saluran pernapasan bagian atas mereka.

Tiga kucing lain yang terinfeksi dimasukkan ke dalam kandang di sebelah kucing yang tidak terinfeksi. Tim kemudian mendeteksi viral load pada salah satu kucing yang terpapar ini, yang menunjukkan bahwa virus itu tertular dari tetesan yang dihembuskan oleh kucing yang terinfeksi. Keempat kucing yang terinfeksi juga menghasilkan antibodi terhadap SARS-CoV-2. Surveilans untuk SARS-CoV-2 pada kucing harus dipertimbangkan sebagai bagian dari upaya untuk menghilangkan COVID-19 pada manusia, catat para penulis dalam pracetak.

Sebuah penelitian menemukan kucing rentan terhadap virus corona, tetapi tidak jelas apakah mereka dapat menginfeksi orang.

Kucing dapat terinfeksi dengan coronavirus yang menyebabkan COVID-19, dan dapat 

menyebarkannya ke kucing lain, tetapi anjing tidak terlalu rentan terhadap infeksi, kata para peneliti di Cina. Tim itu, di Harbin Veterinary Research Institute, juga menyimpulkan bahwa ayam, babi, dan bebek tidak mungkin tertular virus.

Ilmuwan lain mengatakan temuan itu menarik, tetapi pemilik kucing tidak perlu khawatir dulu. Hasilnya didasarkan pada percobaan laboratorium di mana sejumlah kecil hewan secara sengaja diberi dosis tinggi virus, SARS-CoV-2, dan tidak mewakili interaksi kehidupan nyata antara manusia dan hewan peliharaan mereka, kata ahli virus Linda Saif di Ohio. Universitas Negeri di Wooster. Tidak ada bukti langsung bahwa kucing yang terinfeksi mengeluarkan cukup koronavirus untuk menularkannya kepada orang-orang, katanya.

Misteri memperdalam sumber hewan coronavirus

Patroli hewan peliharaan

Dengan coronavirus yang menyebar dengan cepat di seluruh dunia, beberapa orang telah mengangkat kekhawatiran tentang apakah itu dapat menular antara hewan peliharaan dan manusia. Sejauh ini, ada beberapa laporan tentang hewan peliharaan yang terinfeksi: seekor kucing di Belgia dan dua anjing di Hong Kong. "Kucing dan anjing berada dalam kontak dekat dengan manusia, dan oleh karena itu penting untuk memahami kerentanan mereka terhadap SARS-CoV-2 untuk kontrol COVID-19," tulis para penulis studi terbaru ¹ , sebuah cetakan yang diposting di bioRxiv pada tanggal 31 Maret , yang belum ditinjau oleh rekan sejawat.

Tim yang dipimpin oleh ahli virologi Bu Zhigao, memperkenalkan sampel virus SARS-CoV-2 ke dalam hidung lima kucing domestik. Ketika dua dari hewan itu di-eutanasia enam hari kemudian, para peneliti menemukan viral load, juga partikel virus yang menular, di saluran pernapasan bagian atas mereka.

Tiga kucing lain yang terinfeksi dimasukkan ke dalam kandang di sebelah kucing yang tidak terinfeksi. Tim kemudian mendeteksi viral load pada salah satu kucing yang terpapar ini, yang menunjukkan bahwa virus itu tertular dari tetesan yang dihembuskan oleh kucing yang terinfeksi. Keempat kucing yang terinfeksi juga menghasilkan antibodi terhadap SARS-CoV-2. Surveilans untuk SARS-CoV-2 pada kucing harus dipertimbangkan sebagai bagian dari upaya untuk menghilangkan COVID-19 pada manusia, catat para penulis dalam pracetak.

Tidak ada gejala

Tetapi Saif mengatakan bahwa tidak ada kucing yang terinfeksi menunjukkan gejala penyakit, dan hanya satu dari tiga kucing yang terpapar hewan yang terinfeksi yang terserang virus. "Ini menunjukkan virus mungkin tidak menular pada kucing," katanya. Selain itu, cara penularannya tidak jelas karena penelitian ini tidak menggambarkan bagaimana kandang itu dipasang, dan kucing yang tidak terinfeksi bisa tertular virus dari kotoran atau urin yang terkontaminasi.

Diperlukan lebih banyak tes, termasuk beberapa di mana kucing diberikan dosis virus yang berbeda untuk melihat apakah mereka dapat menularkannya ke kucing lain, katanya.

Hasilnya menunjukkan bahwa kucing harus dipertimbangkan dalam upaya untuk mengendalikan COVID-19, tetapi mereka bukan faktor utama dalam penyebaran penyakit, kata Dirk Pfeiffer, seorang ahli epidemiologi di City University of Hong Kong. "Fokus dalam kontrol COVID-19 oleh karena itu tidak diragukan lagi harus tetap tegas dalam mengurangi risiko penularan dari manusia ke manusia."

Studi sebelumnya tentang SARS-CoV, coronavirus terkait yang menyebabkan sindrom pernafasan akut yang parah (SARS), menunjukkan ² bahwa kucing dapat terinfeksi dan menularkannya ke kucing lain. Tetapi “tidak ada indikasi selama pandemi SARS bahwa SARS-CoV menyebar luas pada kucing rumahan atau ditularkan dari kucing ke manusia”, kata Saif.

Pusat Pengendalian dan Pencegahan Penyakit AS merekomendasikan agar orang dengan COVID-19 membatasi kontak dengan hewan peliharaan mereka, termasuk menghindari membelai mereka, menjilat dan berbagi makanan.

"Ini adalah tindakan pencegahan seperti yang disarankan untuk penyakit baru yang muncul di mana hanya tersedia informasi terbatas," kata Saif.

Hewan lain

Para penulis pracetak terbaru juga menemukan bahwa ferret sangat rentan terhadap infeksi virus corona COVID-19, yang mereka sarankan menjadikan hewan-hewan itu model yang cocok untuk menguji vaksin dan obat-obatan potensial. Ferrets sudah digunakan sebagai model dalam studi influenza, dan beberapa laboratorium telah memulai penelitian COVID-19.

Namun, anjing kurang rentan terhadap virus. Para peneliti menyuntik lima anjing muda dengan SARS-CoV-2 dan menemukan bahwa dua viral load yang diekskresikan dalam kotoran mereka, tetapi tidak ada yang mengandung virus menular.

Investigasi serupa pada babi, ayam dan bebek mengidentifikasi tidak ada viral load pada hewan yang sengaja diinokulasi dengan virus, atau pada mereka yang terpapar pada hewan yang diinokulasi.

Temuan ini menunjukkan bahwa tidak ada spesies ini yang berperan dalam epidemiologi COVID-19, kata Pfeiffer.

Referensi

1.     Shi, J. et al. Preprint at bioRxiv https://doi.org/10.1101/2020.03.30.015347 (2020).

2.     Martina et al. Nature 425 , 915 (2003).

Sumber:

Nature, 1 April 2020

https://www.nature.com/articles/d41586-020-00984-8?error=cookies_not_supported&code=0699475a-2819-423d-a3b1-1e8218003364

#COVID19 

#Kucing 

#Anjing 

#Zoonosis 

#HewanPeliharaan

SARS-CoV-2 Menetralkan Antibodi Kucing

SARS-CoV-2 menetralkan antibodi serum pada kucing: Investigasi Serologis

 

RINGKASAN

Penyakit Coronavirus 2019 (COVID-19) yang disebabkan oleh severe acute respiratory syndrome coronavirus 2 (SARS-CoV-2) pertama kali dilaporkan di Wuhan, Cina, dan menyebar dengan cepat ke seluruh dunia. Studi sebelumnya menunjukkan bahwa kucing bisa menjadi hewan yang rentan terhadap SARS-CoV-2. Di sini, kami menyelidiki infeksi SARS-CoV-2 pada kucing dengan mendeteksi antibodi serum spesifik. Dari suatu kohort sampel serum dikumpulkan dari kucing di Wuhan, termasuk 102 sampel setelah wabah COVID-19, dan 39 sebelum wabah. 15 dari 102 (14,7%) sera kucing yang dikumpulkan setelah wabah positif untuk domain pengikatan reseptor (RBD) dari SARS-CoV-2 dengan enzyme linked immunosorbent assay (ELISA) tidak langsung. Di antara sampel positif, 11 memiliki antibodi netralisasi SARS-CoV-2 dengan titer mulai dari 1/20 hingga 1/1080. Tidak ada reaktivitas silang serologis yang terdeteksi antara SARS-CoV-2 dan virus feline infectious peritonitis tipe I atau II (FIPV). Data kami menunjukkan bahwa SARS-CoV-2 telah menginfeksi populasi kucing di Wuhan selama wabah.

Kata kunci: Penyakit Coronavirus 2019 (COVID-19), severe acute respiratory syndrome coronavirus 2 (SARS-CoV-2), penyelidikan serologis, netralisasi antibodi, kucing.

PENDAHULUAN

Pada bulan Desember, 2019, wabah pneumonia yang tidak diketahui penyebabnya terjadi di Wuhan, Cina. Patogen itu segera diidentifikasi sebagai severe acute respiratory syndrome coronavirus 2 (SARS-CoV-2), dan penyakit ini dinamai penyakit coronavirus 2019 (COVID-19) oleh Organisasi Kesehatan Dunia (WHO) (Chen et al., 2020; Zhou et al., 2020a). Gejala klinis COVID-19 terutama meliputi infeksi tanpa gejala, penyakit saluran pernapasan ringan hingga parah, dan bahkan kematian (Huang et al., 2020). Dibandingkan dengan SARS-CoV, SARS-CoV-2 memiliki angka reproduksi dasar yang lebih tinggi, mewakili lebih banyak keterusan (Liu et al., 2020a). Dalam waktu yang sangat singkat, COVID-19 dengan cepat menjadi ancaman yang sangat serius bagi perjalanan, perdagangan, dan kesehatan manusia di seluruh dunia (Bernard Stoecklin dkk., 2020; Ghinai dkk., 2020; Iacobucci, 2020; Shim et al., 2020; Tuite et al., 2020). Pada 28 Maret 2020, total 512.701 kasus yang dikonfirmasi, termasuk 23.495 kematian (4,58%), yang melibatkan 202 negara, wilayah atau wilayah, telah dilaporkan secara global oleh WHO (https://www.who.int/emergencies/diseases / novel-coronavirus-2019). Wabah COVID-19 pertama kali dikonfirmasi di Wuhan, Cina, kemungkinan terkait dengan pasar makanan laut. Namun, sejauh ini, tidak ada bukti bahwa pasar makanan laut adalah sumber asli dari SARS-CoV-2 (Guo et al., 2020). Sebelum SARS-CoV-2, 4 jenis beta coronavirus dapat menginfeksi manusia, termasuk SARS-CoV dan MERS-CoV yang sangat patogen dan keduanya berasal dari kelelawar (Li et al., 2020a; Liu et al., 2020b). Analisis genom menunjukkan bahwa SARS-CoV-2 memiliki 96,2% keseluruhan identitas urutan genom dengan Bat CoV RaTG13, menunjukkan bahwa SARS-CoV-2 juga dapat berasal dari kelelawar (Zhou et al., 2020b). Penularan SARS-CoV-2 dari kelelawar ke manusia diduga melalui kontak langsung antara manusia dan hewan inang perantara (Guo et al., 2020). Namun, masih belum jelas hewan mana yang merupakan inang perantara SARS-CoV-2. Penelitian kami sebelumnya menunjukkan bahwa SARS-CoV-2 menggunakan reseptor entri sel yang sama, angiotensin converting enzyme II (ACE2), seperti SARS-CoV (Zhou et al., 2020b), menunjukkan bahwa SARS-CoV-2 memiliki kisaran inang yang sama sebagai SARS-CoV. Laporan sebelumnya menunjukkan bahwa SARS-CoV dapat menginfeksi musang dan kucing (Martina et al., 2003), menyiratkan bahwa mereka mungkin juga rentan terhadap SARS-CoV-2. Sebagai salah satu hewan peliharaan paling populer, kucing memiliki kontak yang sangat dekat dengan manusia. Oleh karena itu, sangat penting untuk menyelidiki prevalensi SARS-CoV-2 pada kucing, terutama di daerah wabah. Namun, tidak ada survei tentang prevalensi SARS-CoV-2 pada kucing sejauh ini. Studi serologis cocok untuk skrining antibodi terhadap SARS-CoV-2 pada hewan (Reusken et al., 2013). Saat ini, beberapa metode telah diterapkan untuk uji antibodi SARS-CoV-2 pada manusia (Li et al., 2020b). Namun, tidak ada metode yang tersedia untuk mendeteksi antibodi kucing terhadap SARS-CoV-2. Di sini, kami menyelidiki prevalensi serologis SARS-CoV-2 pada kucing dengan ELISA tidak langsung dan tes netralisasi virus, memberikan bukti pertama infeksi SARS-CoV-2 pada kucing.

HASIL

Sebanyak 143 serum kucing diskrening dengan enzyme linked immunosorbent assay (ELISA) tidak langsung untuk reaktivitas antibodi terhadap domain pengikatan reseptor rekombinan (RBD) protein lonjakan SARS-CoV-2. Dari 39 sera yang dikumpulkan sebelum wabah, yang OD-nya bervariasi dari 0,091 hingga 0,261, kami menetapkan cut-off sebagai 0,32. Seperti yang ditunjukkan pada Tabel 1 dan Gambar 1, 15 serum kucing (14,7%) yang dikumpulkan setelah wabah positif, dengan lima yang positif kuat dengan OD lebih dari 0,6. Sera hyperimmune virus peritonitis feline tipe I dan II kucing tidak menunjukkan reaktivitas silang dengan protein SARS-CoV-2 RBD. Untuk mengkonfirmasi keberadaan antibodi spesifik SARS-CoV-2 dalam serum kucing, ke-15 serum positif ELISA diuji dengan tes netralisasi virus atau Virus Netralization Test (VNT) untuk SARS-CoV-2. Dari jumlah tersebut, 11 sera kucing memiliki antibodi netralisasi terhadap SARS-CoV-2 dengan titer mulai dari 1/20 hingga 1/1080 (Tabel 1, Gambar 2A). Namun, 4 sera termasuk # 12, yang merupakan ELISA kuat positif dengan OD 0,85, tidak menunjukkan aktivitas netralisasi. Dan ELISA lain yang positif kuat, # 10, memiliki aktivitas menetralisir yang sangat lemah. Tetapi netralisasi yang kuat diamati untuk ketiga sera ELISA positif yang kuat lainnya, # 4, # 14 dan # 15, dengan titer penetralisasi 1/360 hingga 1/1080. Konsisten dengan titer penetral tinggi, pemilik Cat # 4, Cat # 14 dan Cat # 15 didiagnosis sebagai pasien COVID-19. Kucing # 1, Kucing # 5 ~ 9 berasal dari rumah sakit hewan peliharaan, sedangkan Kucing # 2, Kucing # 10 ~ 13 awalnya kucing liar dan disimpan di tempat perlindungan hewan setelah wabah. Sekali lagi, kedua tipe I dan II FIPV hiperimun serum negatif untuk VNT. Uji Western blot juga dilakukan untuk lebih memverifikasi keberadaan SARS-CoV-2 IgG spesifik dalam serum kucing. Seperti yang ditunjukkan pada Gambar 2 B, # 4, # 14 dan # 15 sera mendeteksi protein S dan N dari SARS-CoV-2 yang dimurnikan, sebagai serum penyembuhan manusia. Sebaliknya, serum kucing ELISA negatif dan serum manusia sehat tidak menyelidiki pita protein. Diskusi Dalam penelitian ini, kami mendeteksi keberadaan antibodi SARS-CoV-2 pada kucing di Wuhan selama wabah COVID-19 dengan ELISA, VNT dan western blot. Sebanyak 102 kucing diuji, 15 (14,7%) positif untuk ELISA berbasis RBD dan 11 (10,8%) lebih positif dengan VNT. Hasil ini menunjukkan bahwa SARS-CoV-2 telah menginfeksi populasi kucing di Wuhan, menyiratkan bahwa risiko ini juga dapat terjadi di daerah wabah lainnya. Investigasi retrospektif mengkonfirmasi bahwa semua serum positif ELISA adalah sampel setelah wabah, menunjukkan bahwa infeksi kucing bisa disebabkan oleh penularan virus dari manusia ke kucing. Tentu saja, masih perlu diverifikasi melalui penyelidikan infeksi SARS-CoV-2 sebelum wabah ini dalam berbagai sampel. Saat ini, tidak ada bukti penularan SARS-CoV-2 dari kucing ke manusia. Namun, sebuah laporan terbaru menunjukkan bahwa SARS-CoV-2 dapat mentransmisikan antar kucing melalui tetesan ekskresi pernapasan (Hualan Chen, 2020), jadi, peringatan dan regulasi yang kuat masih harus dikeluarkan untuk memblokir rute transmisi potensial ini. Tiga kucing yang dimiliki oleh pasien COVID-19 memiliki titer netralisasi tertinggi (masing-masing 1/360, 1/360, dan 1/1080). Sebaliknya, serum yang dikumpulkan dari kucing rumah sakit hewan peliharaan dan kucing liar memiliki aktivitas menetralkan 1/20 hingga 1/80, yang menunjukkan bahwa titer netralisasi yang tinggi bisa disebabkan oleh kontak erat antara kucing dan pasien COVID-19. Meskipun infeksi pada kucing liar belum sepenuhnya dipahami, masuk akal untuk berspekulasi bahwa infeksi ini mungkin disebabkan oleh kontak dengan lingkungan tercemar SARS-CoV-2, atau pasien COVID-19 yang memberi makan kucing. Selain itu, kami juga mengumpulkan swab nasofaring dan anal dari masing-masing kucing, dan melakukan qRT-PCR spesifik SARS-CoV-2 menggunakan kit komersial yang menargetkan gen ORF1ab dan N. Namun, tidak ada sampel positif gen ganda yang terdeteksi. Alasannya mungkin (1) bahwa viral load RNA terlalu rendah untuk dideteksi; (2) sebagai SARS-CoV (Martina et al., 2003), periode dimana kucing melepaskan SARS-CoV-2 mungkin sangat singkat, bersama dengan infeksi asimptomatik, kami tidak menangkap momen infeksi akut; (3) mungkin ada varian dalam urutan genom pada kucing, yang menyebabkan kegagalan dalam amplifikasi dalam sampel kucing. Sepengetahuan kami, ini adalah laporan pertama bahwa hewan menghasilkan antibodi netralisasi khusus terhadap SARS-CoV-2 dalam kondisi alami. Penelitian kami menunjukkan risiko kucing terlibat dalam transmisi SARS-CoV-2. Penelitian lebih lanjut diperlukan untuk menyelidiki rute transmisi SARS-CoV-2 dari manusia ke kucing. Yang penting, tindakan segera harus dilaksanakan untuk menjaga jarak yang sesuai antara manusia dan hewan pendamping seperti kucing dan anjing, dan tindakan kebersihan dan karantina yang ketat juga harus dilakukan untuk hewan-hewan ini.

METODE

Pengumpulan sampel

Sebanyak 102 kucing diambil sampelnya dari tempat penampungan hewan atau rumah sakit hewan peliharaan di Wuhan antara Januari dan Maret 2020. Sampel darah dikumpulkan melalui venipuncture kaki dan serum dipisahkan dan disimpan pada suhu -20 ° C sampai diproses lebih lanjut. Penyeka nasofaring dan anal dikumpulkan dan dimasukkan ke dalam tabung yang mengandung media transportasi viral-penulis VTM (Copan Diagnostics, Brescia, Italia) (Haagmans et al., 2014).

Semua sampel dikumpulkan di bawah peralatan pelindung diri penuh, termasuk penutup kepala, kacamata, masker N95, sarung tangan, dan gaun sekali pakai. Serangkaian 39 sera kucing diambil dari bank serum di lab kami, yang dikumpulkan dari Wuhan antara Maret dan Mei, 2019. Sera hiperimun diperoleh dari Laboratorium Patogen Neuropati, Universitas Pertanian Huazhong, dengan titer netralisasi 1/640 dan 1/1280, masing-masing, terhadap virus infectious peritonitis feline tipe I dan II (FIPV). Serum konvensional pasien COVID-19 dikumpulkan dari rumah sakit Jiangxia Tongji dengan persetujuan pasien dan titer netralisasi 1/1280. Virus dan sel SARS-CoV-2 (IVCAS 6.7512) diisolasi dari pasien COVID-19 seperti yang dijelaskan sebelumnya. (Zhou et al., 2020b) Vero E6 dibeli dari ATCC (ATCC® CRL-1586 ™).

Enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA)

Antibodi diuji oleh ELISA tidak langsung dengan protein SARS-CoV-2 RBD (Sino Biological Inc., China) dan IgG anti-kucing terkonjugasi peroksidase IgG (Sigma-Aldrich, USA). Secara singkat, pelat ELISA dilapisi semalam pada suhu 4 dengan protein RBD (1 μg / ml, 100μl per sumur). Setelah diblokir dengan PBS yang mengandung susu skim 5% selama 2 jam pada suhu 37, pelat ditambahkan dengan serum pada pengenceran 1: 40. Setelah inkubasi selama 30 menit pada suhu 37 ° C, piring dicuci 5 kali dengan pencuci pencuci (PBS). mengandung 0,05% Tween-20). IgG anti-kucing encer 1: 20000 ditambahkan dan diinkubasi selama 30 menit tambahan. Setelah 5 kali pencucian lainnya, Substrat TMB (Sigma-Aldrich, USA) ditambahkan dan diinkubasi selama 10 menit. Kemudian reaksi dihentikan, dan kepadatan optik (OD) diukur pada 450 nm. Sera tersebut dianggap positif jika nilai OD dua kali lebih tinggi dari rata-rata OD dari 39 sera yang dikumpulkan antara Maret dan Mei, 2019. Tes netralisasi virus (VNT) Untuk tes netralisasi virus, sampel serum dilemahkan oleh inkubasi pada suhu 56 °. C selama 30 menit. Setiap sampel serum diencerkan secara serial dengan Dulbecco's Modified Eagle Medium (DMEM) sebagai dua kali lipat atau tiga kali lipat sesuai dengan nilai OD dan kualitas sampel, dicampur dengan volume yang sama dari virus yang diencerkan dan diinkubasi pada suhu 37 ° C selama 1 jam. Sel-sel Vero E6 dalam plat 24-sumur diinokulasi dengan campuran sera-virus pada suhu 37 ° C; 1 jam kemudian, campuran digantikan dengan DMEM yang mengandung 2,5% FBS dan 0,8% karboksimetilselulosa. Pelat difiksasi dengan paraformaldehyde 8% dan diwarnai dengan kristal violet 0,5% 3 hari kemudian. Semua sampel diuji dalam duplikat dan titer netralisasi didefinisikan sebagai pengenceran serum yang menghasilkan pengurangan plak setidaknya 50% (Davies et al., 2005).

Uji Western blotting

Konsentrasi total protein dari SARS-CoV-2 yang dimurnikan dan tidak aktif ditentukan dengan uji protein Bradford (Su et al., 2018). Protein 4 μg mengalami elektroforesis gel natrium dodesil sulfat-poliakrilamida (SDS-PAGE) 8% dan dipindahkan ke membran nitroselulosa. Kemudian protein virus dihilangkan dengan serum kucing atau serum pemulihan manusia. Pita protein divisualisasikan dengan inkubasi dengan IgG anti-kucing kambing atau IgG anti-manusia tikus dan kemudian dideteksi menggunakan Sistem ECL (Amersham Life Science, Arlington Heights, IL, USA).

Referensi

Bernard Stoecklin, S., Rolland, P., Silue, Y., Mailles, A., Campese, C., Simondon, A., Mechain, M., Meurice, L., Nguyen, M., Bassi, C., et al. (2020). First cases of coronavirus disease 2019 (COVID-19) in France: surveillance, investigations and control measures, January 2020. Euro surveillance : bulletin Europeen sur les maladies transmissibles = European communicable disease bulletin 25.

Chen, N., Zhou, M., Dong, X., Qu, J., Gong, F., Han, Y., Qiu, Y., Wang, J., Liu, Y., Wei, Y., et al. (2020). Epidemiological and clinical characteristics of 99 cases of 2019 novel coronavirus pneumonia in Wuhan, China: a descriptive study. Lancet 395, 507-513.

Davies, D.H., McCausland, M.M., Valdez, C., Huynh, D., Hernandez, J.E., Mu, Y., Hirst, S., Villarreal, L., Felgner, P.L., and Crotty, S. (2005). Vaccinia virus H3L envelope protein is a major target of neutralizing antibodies in humans and elicits protection against lethal challenge in mice. Journal of virology 79, 11724-11733.

Ghinai, I., McPherson, T.D., Hunter, J.C., Kirking, H.L., Christiansen, D., Joshi, K., Rubin, R., Morales-Estrada, S., Black, S.R., Pacilli, M., et al. (2020). First known person-to-person transmission of severe acute respiratory syndrome coronavirus 2 (SARS-CoV-2) in the USA. Lancet.

Guo, Y.R., Cao, Q.D., Hong, Z.S., Tan, Y.Y., Chen, S.D., Jin, H.J., Tan, K.S., Wang, D.Y., and Yan, Y. (2020). The origin, transmission and clinical therapies on coronavirus disease 2019 (COVID-19) outbreak - an update on the status. Military Medical Research 7, 11.

Haagmans, B.L., Al Dhahiry, S.H., Reusken, C.B., Raj, V.S., Galiano, M., Myers, R., Godeke, G.J., Jonges, M., Farag, E., Diab, A., et al. (2014). Middle East respiratory syndrome coronavirus in dromedary camels: an outbreak investigation. The Lancet infectious diseases 14, 140-145.

Hualan Chen. Susceptibility of ferrets, cats, dogs, and different domestic animals to SARS-coronavirus-2. doi: https://doi.org/10.1101/2020.03.30.015347.

Huang, C., Wang, Y., Li, X., Ren, L., Zhao, J., Hu, Y., Zhang, L., Fan, G., Xu, J., Gu, X., et al. (2020). Clinical features of patients infected with 2019 novel coronavirus in Wuhan, China. Lancet 395, 497-506.

Iacobucci, G. (2020). Covid-19: all non-urgent elective surgery is suspended for at least three months in England. Bmj 368, m1106. Li, B., Si, H.R., Zhu, Y., Yang, X.L., Anderson, D.E., Shi, Z.L., Wang, L.F., and Zhou, P. (2020a). Discovery of Bat Coronaviruses through Surveillance and Probe Capture-Based Next-Generation Sequencing. mSphere 5.

Li, Z., Yi, Y., Luo, X., Xiong, N., Liu, Y., Li, S., Sun, R., Wang, Y., Hu, B., Chen, W., et al. (2020b). Development and Clinical Application of A Rapid IgM-IgG Combined Antibody Test for SARS-CoV-2 Infection Diagnosis. Journal of medical virology.

Liu, Y., Gayle, A.A., Wilder-Smith, A., and Rocklov, J. (2020a). The reproductive number of COVID-19 is higher compared to SARS coronavirus. Journal of travel medicine 27.

Liu, Z., Xiao, X., Wei, X., Li, J., Yang, J., Tan, H., Zhu, J., Zhang, Q., Wu, J., and Liu, L. (2020b). Composition and divergence of coronavirus spike proteins and host ACE2 receptors predict potential intermediate hosts of SARS-CoV-2. Journal of medical virology.

Martina, B.E., Haagmans, B.L., Kuiken, T., Fouchier, R.A., Rimmelzwaan, G.F., Van Amerongen, G., Peiris, J.S., Lim, W., and Osterhaus, A.D. (2003). Virology: SARS virus infection of cats and ferrets. Nature 425, 915.

author/funder. It is made available under a CC-BY-NC-ND 4.0 International license. bioRxiv preprint doi: https://doi.org/10.1101/2020.04.01.021196. The copyright holder for this preprint (which was not peer-reviewed) is the Reusken, C.B., Haagmans, B.L., Muller, M.A., Gutierrez, C., Godeke, G.J., Meyer, B., Muth, D., Raj, V.S., Smits-De Vries, L., Corman, V.M., et al. (2013). Middle East respiratory syndrome coronavirus neutralising serum antibodies in dromedary camels: a comparative serological study. The Lancet infectious diseases 13, 859-866.

Shim, E., Tariq, A., Choi, W., Lee, Y., and Chowell, G. (2020). Transmission potential and severity of COVID-19 in South Korea. International journal of infectious diseases : IJID : official publication of the International Society for Infectious Diseases.

Su, X., Tian, Y., Zhou, H., Li, Y., Zhang, Z., Jiang, B., Yang, B., Zhang, J., and Fang, J. (2018). Inactivation Efficacy of Nonthermal Plasma-Activated Solutions against Newcastle Disease Virus. Applied and environmental microbiology 84.

Tuite, A.R., Ng, V., Rees, E., and Fisman, D. (2020). Estimation of COVID-19 outbreak size in Italy. The Lancet infectious diseases.

Zhou, F., Yu, T., Du, R., Fan, G., Liu, Y., Liu, Z., Xiang, J., Wang, Y., Song, B., Gu, X., et al. (2020a). Clinical course and risk factors for mortality of adult inpatients with COVID-19 in Wuhan, China: a retrospective cohort study. Lancet.

Zhou, P., Yang, X.L., Wang, X.G., Hu, B., Zhang, L., Zhang, W., Si, H.R., Zhu, Y., Li, B., Huang, C.L., et al. (2020b). A pneumonia outbreak associated with a new coronavirus of probable bat origin. Nature 579, 270-273.

Sumber:

Qiang Zhang, Huajun Zhang, Kun Huang, Yong Yang, Xianfeng Hui, Jindong Gao, Xinglin He, Chengfei Li, Wenxiao Gong, Yufei Zhang, Cheng Peng, Xiaoxiao Gao, Huanchun Chen, Zhong Zou1, Zhengli Shi, and Meilin Jin.  2020.  SARS-CoV-2 neutralizing serum antibodies in cats: a serological investigation. 

https://doi.org/10.1101/2020.04.01.021196.

file:///C:/Users/User/Downloads/2020.04.01.021196v1.full.pdf       

diunduh 6 April 2020 jam 13:00.

Manajemen Pencegahan dan Pengendalian COVID-19

I. MANAJEMEN AREA ISOLASI

1 Klinik Demam

1.1 Tata Letak

(1) Fasilitas kesehatan harus mendirikan klinik demam yang relatif independen termasuk jalur satu arah eksklusif di pintu masuk rumah sakit dengan tanda yang terlihat;

(2) Pergerakan orang harus mengikuti prinsip "tiga zona dan dua bagian": zona yang terkontaminasi, zona yang berpotensi terkontaminasi dan zona bersih yang disediakan dan ditandai dengan jelas, dan dua zona penyangga antara zona yang terkontaminasi dan zona yang berpotensi terkontaminasi;

(3) Bagian independen harus dilengkapi untuk kiriman yang terkontaminasi; mengatur wilayah visual untuk pengiriman barang satu arah dari area kantor (zona berpotensi terkontaminasi) ke ruang isolasi (zona terkontaminasi);

(4) Prosedur yang sesuai harus distandarisasi bagi personel medis untuk mengenakan dan melepas peralatan pelindung mereka. Buat diagram alur dari berbagai zona, berikan cermin ukuran penuh dan amati rute jalan dengan ketat;

(5) Teknisi pencegahan dan pengendalian infeksi harus ditugaskan untuk mengawasi tenaga medis dalam mengenakan dan mengeluarkan peralatan pelindung untuk mencegah kontaminasi;

(6) Semua barang di zona terkontaminasi yang belum didesinfeksi tidak boleh dibuang.

1.2 Pengaturan Zona

(1) Mendirikan ruang pemeriksaan independen, laboratorium, ruang observasi, dan ruang resusitasi;

(2) Menyiapkan area pra-pemeriksaan dan triase untuk melakukan penyaringan awal pasien;

(3) Zona diagnosis dan pengobatan yang terpisah: pasien dengan riwayat epidemiologi dan demam dan / atau gejala pernapasan harus dipandu ke dalam zona pasien COVID-19 yang dicurigai; pasien dengan demam biasa tetapi tidak memiliki riwayat epidemiologi yang jelas harus dipandu ke zona pasien demam biasa.

1.3 Manajemen Pasien

(1) Pasien dengan demam harus memakai masker bedah medis;

(2) Hanya pasien yang diizinkan masuk ke ruang tunggu untuk menghindari kepadatan yang berlebihan;

(3) Durasi kunjungan pasien harus diminimalkan untuk menghindari infeksi silang;

(4) Mendidik pasien dan keluarganya tentang identifikasi dini gejala dan tindakan pencegahan penting.

1.4 Penyaringan, Penerimaan dan Pengecualian

(1) Semua petugas kesehatan harus sepenuhnya memahami fitur epidemiologis dan klinis COVID-19 dan menyaring pasien sesuai dengan kriteria skrining;

(2) Pengujian asam nukleat (NAT) harus dilakukan pada pasien yang memenuhi kriteria skrining untuk pasien yang diduga;

(3) Pasien yang tidak memenuhi kriteria skrining di atas, jika mereka tidak memiliki riwayat epidemiologi yang dikonfirmasi, tetapi tidak dapat dikesampingkan memiliki COVID-19 berdasarkan gejala mereka, terutama melalui pencitraan, direkomendasikan untuk evaluasi lebih lanjut dan untuk mendapatkan diagnosis komprehensif;

(4) Setiap pasien yang dites negatif harus diuji ulang 24 jam kemudian. Jika seorang pasien memiliki dua hasil NAT negatif dan manifestasi klinis negatif, maka ia dapat dikecualikan dari memiliki COVID-19 dan dipulangkan dari rumah sakit. Jika pasien tersebut tidak dapat dikesampingkan memiliki infeksi COVID-19 berdasarkan manifestasi klinis mereka, mereka harus menjalani tes NAT tambahan setiap 24 jam sampai mereka dikeluarkan atau dikonfirmasi;

(5) Kasus-kasus yang dikonfirmasi dengan hasil NAT positif harus diterima dan diobati secara kolektif berdasarkan keparahan kondisinya (bangsal isolasi umum atau ICU terisolasi).

2. AREA RUANG ISOLASI

2.1 Ruang Lingkup 

Penerapan Area ruang isolasi mencakup area ruang observasi, ruang isolasi, dan area ICU isolasi. Tata letak dan alur kerja bangunan harus memenuhi persyaratan yang relevan dari peraturan teknis isolasi rumah sakit. Penyedia medis dengan ruang tekanan negatif harus menerapkan manajemen standar sesuai dengan persyaratan yang relevan. Batasi akses ke bangsal isolasi dengan ketat.

2.2 Tata Letak Silakan merujuk ke klinik demam

2.3 Persyaratan Lingkungan

(1) Pasien yang dicurigai dan dikonfirmasi harus dipisahkan di area bangsal yang berbeda;

(2) Pasien yang dicurigai harus diisolasi di kamar tunggal yang terpisah. Setiap kamar harus dilengkapi dengan fasilitas seperti kamar mandi pribadi dan aktivitas pasien harus dibatasi di bangsal isolasi;

(3) Pasien yang dikonfirmasi dapat diatur di ruangan yang sama dengan jarak tempat tidur tidak kurang dari 1,2 meter (appx 4 kaki). Kamar harus dilengkapi dengan fasilitas seperti kamar mandi dan aktivitas pasien harus dibatasi di ruang isolasi.

2.4 Manajemen Pasien

(1) Kunjungan keluarga dan perawatan harus ditolak. Pasien harus diizinkan memiliki perangkat komunikasi elektronik untuk memfasilitasi interaksi dengan orang yang dicintai;

(2) Mendidik pasien untuk membantu mereka mencegah penyebaran COVID-19 lebih lanjut, dan memberikan instruksi tentang cara memakai masker bedah, cuci tangan yang tepat, etiket batuk, observasi medis dan karantina rumah.

II Manajemen Staf

Manajemen Alur Kerja

(1) Sebelum bekerja di klinik demam dan ruang isolasi, staf harus menjalani pelatihan yang ketat dan pemeriksaan untuk memastikan bahwa mereka tahu cara mengenakan dan melepaskan peralatan pelindung pribadi. Mereka harus lulus ujian sebelum diizinkan bekerja dalam bangsal ini.

(2) Staf harus dibagi ke dalam tim yang berbeda. Setiap tim harus dibatasi hingga maksimum 4 jam bekerja di ruang isolasi. Tim akan bekerja dalam isolasi bangsal (zona yang terkontaminasi) pada waktu yang berbeda.

(3) Atur perawatan, pemeriksaan dan disinfeksi untuk masing-masing tim sebagai kelompok untuk mengurangi frekuensi staf bergerak masuk dan keluar dari bangsal isolasi.

(4) Sebelum berhenti bertugas, staf harus mencuci sendiri dan melakukan rejimen kebersihan pribadi yang diperlukan untuk mencegah kemungkinan infeksi pada saluran pernapasan dan mukosa mereka.

Manajemen Kesehatan

(1) Staf garis depan di daerah isolasi - termasuk tenaga kesehatan, teknisi medis dan personil properti & logistik - akan tinggal di isolasi akomodasi dan tidak akan keluar tanpa izin.

(2) Diet bergizi harus disediakan untuk meningkatkan kekebalan tenaga medis.

(3) Pantau dan catat status kesehatan semua staf di tempat kerja, dan lakukan pemantauan kesehatan untuk staf lini depan, termasuk pemantauan suhu tubuh dan gejala pernapasan; membantu mengatasi masalah psikologis dan fisiologis yang muncul dengan para pakar yang relevan.

(4) Jika staf memiliki gejala yang relevan seperti demam, mereka harus segera diisolasi dan dikonfirmasi dengan NAT.

(5) Ketika staf garis depan termasuk tenaga kesehatan, teknisi medis dan properti & personel logistik menyelesaikan pekerjaan mereka di area isolasi dan kembali ke kehidupan normal, pertama-tama mereka harus diuji NAT untuk SARS-CoV-2. Jika negatif, mereka harus diisolasi secara kolektif di area tertentu selama 14 hari sebelum dikeluarkan dari pengamatan medis.

Pengembangan Vaksin Nabati COVID-19

 

Vaksin Nabati COVID-19 Dikembangkan oleh Medicago Canada

 

 

Perusahaan biofarmasi Kanada mengumumkan lompatan ke depan dalam mengembangkan vaksin untuk COVID-19.

Medicago telah membuat kemajuan yang signifikan dalam memproduksi vaksin nabati eksperimental untuk COVID-19.

Perusahaan biofarmasi yang berkantor pusat di Kanada ini menggunakan partikel mirip virus (VLP) yang ditanam di Nicotiana Benthamiana, kerabat dekat pabrik tembakau, untuk mengembangkan vaksin potensial terhadap penyakit coronavirus yang kini telah mencapai tingkat pandemi global.

Ini adalah contoh seberapa cepat sains dan inovasi dapat mencapai hasil positif bagi masyarakat, terlepas dari siapa yang mendanainya.

Menyusul pengumumannya, Medicago, yang didanai sebagian oleh Philip Morris International (PMI), mengatakan siap untuk memulai pengujian praklinis untuk keamanan dan kemanjuran, mengantisipasi awal uji coba manusia pada musim panas ini.

Medicago adalah pemimpin dalam teknologi nabati berpemilik yang menggunakan partikel seperti virus (VLP) untuk mengembangkan vaksin berbasis protein, alih-alih mengandalkan produk hewani atau virus hidup.

Keuntungan VLP dibandingkan vaksin tradisional

Partikel mirip virus (VLP) digunakan untuk membuat vaksin nabati, yang meniru virus, memungkinkan sistem kekebalan tubuh untuk mengenalinya dan membuat respons imun. Tetapi VLP ini tidak memiliki bahan genetik inti dari suatu virus, sehingga VLP tidak menular dan tidak bisa ditiru.

Teknologi Medicago hanya membutuhkan urutan genetik dari strain virus, bukan virus hidup itu sendiri. Jadi, perusahaan dapat memproduksi secara massal terapi untuk mengkonter infeksi pandemi seperti COVID-19 dalam waktu sebulan setelah petugas kesehatan mengidentifikasinya.

VLP vs pengembangan vaksin tradisional

Sebagai perbandingan, pengembangan vaksin tradisional pada telur ayam membutuhkan enam hingga sembilan bulan. Produsen vaksin menyuntikkan virus ke dalam telur, tempat virus itu menyebar. Tetapi menggunakan telur itu mahal, butuh waktu lama, dan jauh dari sempurna. Mutasi dapat menghasilkan vaksin yang tidak cocok dengan virus yang ingin dimatikan.

Menggunakan pendekatan nabati relatif baru, tetapi telah berkembang pesat dalam dekade terakhir. Ini memasukkan urutan genetik ke dalam agrobacterium, bakteri berbasis tanah, yang diambil oleh tanaman - dalam hal ini, kerabat dekat tanaman tembakau. Pabrik mulai menghasilkan protein, yang kemudian dapat digunakan sebagai vaksin. Jika virus mulai bermutasi, seperti yang diharapkan untuk COVID-19, mereka dapat memperbarui produksi menggunakan tanaman baru.

Menggunakan tanaman dan agrobakteri hasil rekayasa genetika bekerja lebih cepat daripada telur, dan juga membuat vaksin lebih mudah diproduksi dalam skala besar.

Medicago bukanlah orang baru dalam pekerjaan inovatif pada vaksin

Selain perawatan coronavirus, jalur karya Medicago mencakup virus eksperimental lain dan terapi pandemi. Produk pertamanya, vaksin flu musiman, saat ini sedang ditinjau oleh Health Canada.

Perusahaan ini juga menggunakan teknologinya untuk mengembangkan antibodi terhadap SARS-CoV-2 bekerja sama dengan Laval University’s Infectious Disease Research Center.  Menurut penelitian terbaru, antibodi berpotensi digunakan untuk mengobati orang yang terinfeksi oleh coronavirus.

Medicago sebagian dimiliki oleh Philip Morris International, dan merupakan bagian dari program baru perusahaan, berdasarkan sains, teknologi, dan inovasi. PMI mengakuisisi saham di Medicago pada 2013, dan saat ini memegang sekitar sepertiga saham perusahaan. Mitsubishi Tanabe Pharma yang berbasis di Jepang memiliki sisa dua pertiganya

Sumber:

Phlilip Moris International

https://www.pmi.com/media-center/news/medicago-develops-a-plant-based-vaccine-for-coronavirus