Ada sejumlah keuntungan menggunakan sapi dan ayam
untuk produksi antibodi. Produksi Ig G kolostrum
sapi atau produksi IgY ayam hanya membutuhkan pengumpulan susu atau telur, dan
merupakan sumber antibodi yang relatif murah dibandingkan dengan pengumpulan
darah pada mamalia lain.
Kolostrum dari hewan yang diimunisasi bisa memiliki
peningkatan titer antibodi lebih dari 100 kali lipat dibandingkan dengan
kolostrum dari hewan yang tidak diimunisasi (Janson et al., 1994). Kolostrum
mengandung antara 30 dan 200 mg imunoglobulin per mililiter, sebagian besar
(75%) di antaranya adalah IgG1 (Berghman et al., 2005).
Sapi menghasilkan sekitar 1-1,5 kg imunoglobulin dalam
beberapa hari pertama setelah melahirkan; karena itu menarik untuk produksi
antibodi skala besar. Protokol imunisasi bervariasi dan umumnya, imunisasi
berulang diberikan selama akhir kehamilan atau selama periode kering kandang.
Banyak dari studi ini telah menggunakan imunisasi intramuskular atau subkutan,
meskipun beberapa juga telah memasukkan imunisasi oral atau intramammary tetapi
dengan keberhasilan yang kurang.
Sekresi susu kemudian dikumpulkan pada saat pemerahan
pertama atau dikumpulkan dari empat hingga enam pemerahan pertama atau dari enam
hingga 10 hari pertama setelah melahirkan (Hurley dan Theil, 2011).
Produksi Ig Y
ayam lebih mudah dan murah
Imunisasi ayam hanya membutuhkan sejumlah kecil
antigen untuk mendapatkan titer IgY yang tinggi dan tahan lama dalam kuning
telur (Tini et al., 2002). Rute injeksi yang paling umum adalah intramuskular
karena menghasilkan tingkat antibodi IgY spesifik yang lebih tinggi daripada
imunisasi subkutan (Chang et al., 1999). Konsentrasi IgY dalam kuning telur
bisa mencapai 25 mg / mL. Karena induk ayam dapat bertelur hingga 250 telur
dalam setahun, hasil IgY yang hiperimunisasi bisa besar. Karena 160 mg IgY
dapat diperoleh dari satu telur, satu induk ayam yang diimunisasi dapat
menghasilkan 40 g IgY dalam satu tahun, yang mana 1–10% dapat diharapkan spesifik
antigen (Hatta et al., 1997).
Berbeda dengan serum mamalia, kuning telur hanya
mengandung satu kelas antibodi (IgY), yang dapat dengan mudah diisolasi dari
kuning telur dengan teknik presipitasi, dan IgY tidak mengaktifkan komplemen
mamalia atau berinteraksi dengan reseptor Fc mamalia yang dapat memediasi
respons inflamasi. (Kovacs-Nolan and Mine, 2012).
Ketahanan bovine IgG1 dan IgY terhadap
pH rendah dan proteolisis luminal menjadikannya secara fungsional mirip dengan
IgA manusia dan cocok untuk pemberian oral (Kovacs-Nolan and Mine, 2012).
Ruminansia memberikan kekebalan ibu (maternal
antibody) hanya setelah kelahiran (postnatal) melalui antibodi kolostral
(Quigley, 2002), sehingga antibodi kolostrum dan kuning telur secara rutin
digunakan untuk profilaksis dan terapi penyakit menular pada hewan ternak
(Berghman et al., 2005).
Sediaan imunoglobulin sapi terhadap
rotavirus dan E. coli ETEC telah
tersedia secara komersial untuk digunakan pada hewan ternak selama beberapa
dekade karena biayanya murah dan mudah pemberiannya.
Sejumlah besar studi klinis terkontrol
menggunakan kolostrum sapi atau antibodi kuning telur hiperimun telah menunjukkan
efek profilaksis dan terapi terhadap patogen oral dan gastrointestinal pada
manusia, termasuk E. coli
enterotoksikogenik, Helicobacter pylori, karies gigi yang menyebabkan Streptococcus mutans, dan infeksi rotaviral ( Hurley dan Theil, 2011; Kovacs-Nolan
dan Mine, 2012; Weiner et al., 1999).
Kemampuan antibodi sapi dan kuning
telur untuk memberikan perlindungan terhadap penyakit tertentu terus menjadi
bidang yang diminati (Ng et al., 2010). Sebagai contoh, IgG sapi dengan
reaktivitas gp140 bisa mampu menetralkan human
immunodeficiency virus (HIV) telah dikembangkan sebagai mikrobisida topikal
yang berpotensi manjur dan terjangkau (Kramski et al., 2012).
Cara Produksi IgY pada ayam
Ayam dapat
digunakan untuk produksi antibodi selama periode bertelurnya. Untuk alasan
praktis dan ekonomis, ayam yang dipelihara dalam kondisi lapangan biasanya
diimunisasi secara intramuskuler pada otot dada atau subkutan (Schade et al.,
1996; Carlander et al., 2002). Injeksi antigen secara intramuskular sering menghasilkan
tingkat antibodi yang lebih tinggi pada hari ke 28 setelah imunisasi (Wooley
& Landon, 1995). Ayam yang diimunisasi secara intramuskuler terus
memproduksi antibodi spesifik selama lebih dari 200 hari atau dapat digunakan
untuk seluruh periode bertelur tergantung pada titer antibodi hasil induksi
yang diperoleh (Horton et al., 1984; Schade et al., 1996).
Jumlah total
imunisasi yang diperlukan akan tergantung pada jenis dan dosis antigen, serta
pada bahan pembantu tertentu yang digunakan. Apakah titer antibodi mulai
berkurang, imunisasi booster dapat diterapkan selama periode bertelur.
Vaksinasi primer dan booster harus diberikan secara khusus sebelum periode
bertelur, dengan interval 6 minggu untuk adjuvan tipe emulsi dan 4 minggu untuk
adjuvan lipopeptida (Schade et al., 1996).
Menurut
Schade et al. (1996), penggunaan ayam dalam kandang konvensional digunakan
untuk tujuan ilmiah, tetapi ketika antibodi digunakan untuk tujuan terapeutik
dan untuk manusia maka wajib menggunakan ayam specific pathogens free (SPF). Untuk meningkatkan produksi antibodi kuning
telur digunakan galur ayam yang berproduksi tinggi melalui seleksi genetik
dalam galur yang sama (Carlander, 2002).
IgY ayam
menunjukkan aviditas tinggi (109L / mol) bahkan setelah imunisasi pertama.
Untuk mencapai nilai aviditas yang sama (1010L / mol), seekor domba, misalnya,
harus menerima empat booster (Wooley and Landon, 1995). Larsson et al. (1998),
mempelajari respons imun pada ayam menggunakan sejumlah kecil antigen mamalia,
dan mengamati respons imun yang baik yang diperoleh dengan penggunaan 0,1-1,0
μg serum albumin sapi. Disarankan bahwa berbagai konsentrasi antigen harus
dikombinasikan dengan ajuvan. Namun, biasanya digunakan 25-100 μg antigen per
imunisasi, meskipun dimungkinkan untuk mendapatkan respon imun yang baik dengan
hanya 1 μg per imunisasi (Carlander, 2002).
Keunggulan penggunaan Ig Y
Antibodi IgY
memiliki banyak keunggulan dibandingkan antibodi IgG seperti aviditas kuat,
produktivitas tinggi, pengujian murah, dan bisa diterapkan pada banyak
immunoassay untuk meningkatkan kinerja dan akurasi pengujian. Ciri-ciri
menguntungkan lainnya dari IgY : (a) bisa mengikat antibodi pada berbagai jenis
hewan inang; (b) tidak adanya aktivasi serangkaian komplemen mamalia dan
interaksi dengan faktor-faktor reumatoid, atau reseptor bakteri dan
manusia. Hal ini akan membantu
mengurangi biaya uji klinis dan penelitian imunologi.
Penggunaan
IgY merupakan metode alternatif penggunaan IgG mamalia. Hal ini sesuai dengan upaya internasional
yang bertujuan untuk: (a) mengurangi atau bahkan mengganti hewan dalam
eksperimen ilmiah; (b) lebih banyak lagi karakteristik yang diinginkan dan (c)
aplikasi lain untuk imunodiagnostik.
Daftar Pustaka :
No comments:
Post a Comment