Pada 31 Desember 2019, satu klaster etiologi kasus
pneumonia yang tidak diketahui dilaporkan di Wuhan, Provinsi Hubei, Tiongkok [1]. Virus Severe
Acute Respiratory Syndrome coronavirus
2 (SARS-CoV-2) diisolasi oleh para ilmuwan Tiongkok pada 7 Januari 2020. Hingga
saat ini, virus SARS-CoV-2 yang menimbulkan pandemi penyakit COVID-19 menyebar
ke seluruh dunia.
Anu Haveri et al.
menggambarkan urutan waktu kejadian di sekitar kasus COVID-19 pertama yang
diimpor ke Finlandia, dan merangkum data klinis, molekuler dan serologis.
Isolasi virus SARS-CoV-2/Finland/1/2020 yang telah berhasil dengan baik
memungkinkan mereka untuk menggunakan uji mikronetralisasi atau microneutralisation (MN) Assay berdasarkan timbulnya cytopathic effect (CPE) untuk mendeteksi level antibodi yang menetralkan
secara spesifik virus SARS-CoV-2. Sampel
serum diagnostik kasus dan tiga kontak dekat dianalisis dan dibandingkan dengan
sampel serum dari populasi orang Finlandia yang dikumpulkan pada tahun 2019.
Presentasi
klinis dan konfirmasi laboratorium dari kasus ini
Kasus COVID-19 pertama di Finlandia adalah seorang turis
Tiongkok berusia 30-an, yang telah meninggalkan Wuhan pada 22 Januari 2020 dan
tiba di Finlandia pada 23 Januari 2020. Gejala pertamanya adalah pilek pada 26
Januari 2020 dan mual pada 27 Januari 2020. Karena demam tinggi (39°C),
kelemahan dan batuk lalu ia mencari perawatan medis pada 28 Januari 2020.
Kecurigaan COVID-19 sehingga dia dibawa langsung ke Rumah Sakit Pusat Lapland
di Rovaniemi, di mana ia diisolasi dan diambil sampelnya pada tanggal 28 dan 29
Januari 2020 untuk dikonfirmasi adanya infeksi SARS-CoV-2 dengan uji laboratorium (Gambar 1).
Infeksi SARS-CoV-2 dikonfirmasi dari sampel nasofaring pada tanggal 29 Januari 2020
oleh Laboratorium Rumah Sakit Universitas Helsinki atau Helsinki University Hospital Laboratory (HUSLAB), dan selanjutnya
dikonfirmasi di Institut Kesehatan dan Kesejahteraan Finlandia atau Finnish Institute for Health and Welfare (THL) (Tabel). Kedua
laboratorium melakukan pengujian RT-PCR untuk tiga target: amplop
(E). RNA-dependent RNA polymerase (RdRp) dan nucleocapsid (N).
Primer dan probe didasarkan pada Corman et al. metode[2]. Nilai
ambang siklus atau Cycle threshold (Ct) values di
atas 37 dianggap negatif.
Gambar 1.
Tabel 1.
Pasien kasus ini memiliki gejala ringan selama periode
isolasi. Dia diuji PCR-negatif dalam sampel tanggal 3 dan 4 Februari 2020 dan,
karena dianggap asimptomatik, dikeluarkan dari rumah sakit pada 5 Februari 2020.
Satu sampel tambahan untuk serologi dan PCR diambil masing-masing pada tanggal
14 dan 17 Februari 2020. Secara keseluruhan terdapat 21 kontak dekat dapat diidentifikasi
dan bisa diperoleh 17. Empat belas masih
di Finlandia dan ditempatkan di karantina selama 14 hari. Informasi tentang
tiga kontak dekat yang telah meninggalkan negara itu dikomunikasikan kepada
pihak yang berwenang di negara masing-masing. Untuk empat kontak dekat yang
tersisa, tidak bisa diketahui secara rinci. Dua dari 21 kontak dekat terpapar erat dan
oleh karena itu sampel pada hari 4, 10, 12 dan 14 setelah gejala pertama dari
kasus indeks (index
case).
Tindak lanjut dari semua kontak berakhir pada 11 Februari 2020 tanpa peristiwa
transmisi sekunder.
Isolasi
virus SARS-CoV-2/Finlandia/1/2020
Virus SARS-CoV-2 SARS-CoV-2/Finland/1/2020 diisolasi di
laboratorium tingkat keamanan 3 atau biosafety level 3 (BSL-3) dalam sel Vero E6 dari Hari ke 4 swab nasofaring
atau nasopharyngeal (NPS) swab dan nasofaring aspirat atau
nasopharyngeal
aspirate (NPA) spesimen (Tabel). Sampel diinokulasi ke
dalam sel selama 1 jam dalam inkubator 5% CO2 pada suhu 37°C dan media kultur baru
(Eagle's minimum
essential medium
(EMEM) ditambah dengan 2% serum janin sapi (FBS), 0,6 ug / mL penicillin, 60 ug
/ mL streptomisin, 2 mM L-glutamin, 20 mM HEPES) ditambahkan untuk inkubasi.
Pada Hari ke 4 inkubasi, setengah dari kultur dipasase sesara blind-passage ke sel Vero E6 segar dan sisanya
dari bagian asli diinkubasi lebih lanjut. Setelah 4 hari inkubasi, CPE yang
jelas terdeteksi dalam kultur yang berasal dari NPA. Perkembangbiakan virus stok dilakukan dengan
cara pasase menggunakan dosis virus yang rendah sekali lagi dalam sel Vero E6,
dan kultur virus dipanen pada Hari ke-3. Konsentrasi virus mengikuti uji
RT-PCR. Nilai Ct untuk pasase virus
pertama pada hari ke 6 inkubasi adalah 17,65 dan untuk pasase virus ke 2 pada
hari ke-2, sebelum timbul CPE adalah 20,63, sedangkan spesimen NPS tetap pada
nilai Ct antara 35 dan 36.
Sequencing
seluruh genom SARS-CoV-2 / Finlandia / 1/2020
Hampir lengkap coding
region daripada SARS-CoV-2 (nomor akses GenBank: MT020781) diurutkan dari
NPS yang dikumpulkan pada Hari 4 (Tabel) dan wilayah pengkodean lengkap
diurutkan dari isolat virus yang diperoleh setelah tiga bagian dalam sel Vero
E6. Virus ini memiliki substitusi pertama C21707T dibandingkan dengan strain
referensi Wuhan-Hu-1 yang dikumpulkan di Wuhan Tiongkok, Desember 2019
(NC_045512)[3] yang menyebabkan substitusi histidin menjadi tirosin
(H49Y) dalam domain N-terminal dari domain Spike
glikoprotein.
Respons antibodi
selama infeksi SARS-CoV-2
Sampel serum dikumpulkan dari kasus indeks pada Hari ke 4,
9, 10 dan 20 dari timbulnya gejala pertama (Gambar 1). Adanya antibodi IgM dan
IgG terhadap SARS-CoV-2 dianalisis dengan uji imunofluoresensi (IFA) menggunakan
sel Vero E6 yang diinokulasi dengan virus pasase ke 4 dari isolat virus pasien
SARS-CoV-2/Finland/1/2020 dan ditransfer ke slide mikroskop dan difiksasi
dengan aseton (Gambar 2). Sampel serum dari kasus indeks diencerkan secara seri
dan diinkubasi selama 2 jam untuk IgM dan selama 30 menit untuk IgG. Antibodi
divisualisasikan dengan fluorescein
isothiocyanate (FITC)-conjugated anti-human IgM atau IgG antibodies. Sementara antibodi tidak
terdeteksi pada Hari ke 4 setelah timbulnya gejala, titer IgG naik menjadi 80
dan 1.280 dan titer IgM menjadi 80 dan 320 masing-masing pada Hari ke 9 dan 20
(Tabel). Sampel serum acak dari anggota staf Universitas Helsinki (n = 19)
tidak menunjukkan reaksi-ikatan spesifik pada pengenceran lebih besar dari 20
(Gambar 2).
Gambar 2.
Antibodi IgM dan IgG Anti-SARS-CoV-2 dapat dideteksi
dengan uji imunofluoresensi dalam sampel dari Hari ke 9, 10 dan 20 setelah
timbulnya penyakit. Baik IgM dan IgG ditemukan pada titer 80 pada Hari ke 9,
titer pada Hari ke 20 adalah 320 dan 1.280. Sebagai contoh, pengenceran 1:20
dan 1:160 dari sampel Hari ke 20 ditunjukkan untuk masing-masing IgM dan IgG
dari kasus indeks. Pengenceran 1:20 ditunjukkan untuk serum kontrol.
Sel Vero E6 yang terinfeksi Mock dan SARS-CoV2 yang
dikumpulkan pada Hari ke 6 pasca infeksi dilisiskan dalam buffer sampel
Laemmli, dan Western blotting (WB)
dari lisat dilakukan seperti yang dijelaskan sebelumnya[4]. Pada
pengenceran 1:200, serum pemulihan pada Hari ke 20 mengidentifikasi band protein SARS-CoV2 N, S dan E
(Gambar 3). Pada paparan yang lebih tinggi, semua band dapat dideteksi bahkan pada pengenceran serum 1: 1.600 (Gambar
3).
Gambar 3.
Panel kiri atas: pewarnaan protein total (Ponceau S) dari membran nitroselulosa
sebelum diperiksa. Panel kanan atas: strip diperiksa dengan pengenceran berbeda
dari serum pasien pada paparan rendah. Panel bawah: membran yang sama
dikontraskan secara individual untuk intensitas pita yang lebih tinggi. Tanda
panah menunjukkan protein SARS-CoV-2, pelabelan mengasumsikan bahwa migrasi
protein SARS-CoV-2 mirip dengan protein SARS-CoV yang diekspresikan Vero E6. [23]
Band
yang berada pada ca 110 dan 90 kDa mungkin masing-masing mewakili S1 dan S2.
Marker M: Precision Plus Dual Color
Standards (Bio-Rad). Deteksi dilakukan menggunakan Odyssey Infrared Imaging System (LI-COR) menggunakan goat anti-human IR800 conjugate pada pengenceran 1: 10.000.
Tingkat netralisasi antibodi spesifik SARS-CoV-2 diukur
dalam rangkap dua dengan uji MN di laboratorium BSL-3. Sampel serum diinaktivasi dengan panas pada
56°C selama 30 menit dan 2 kali lipat diencerkan secara serial mulai dari 1: 4
dalam EMEM ditambah dengan 2% FBS dan antibiotik yang dilemahkan oleh panas.
Lima puluh unit pembentuk plak (PFU) dari galur SARS-CoV-2/Finland/1/2020
ditambahkan ke pengenceran serum dan diinkubasi selama 1 jam pada suhu 37°C.
Sel-sel Vero E6 (5 × 104 / well) ditambahkan ke campuran virus-serum, dan kemudian
campuran ini diinkubasi pada 96-well plate selama 4 hari dalam incubator 5% CO2
pada suhu 37°C. Netralisasi dinilai dengan timbulnya CPE pada kulture. Titik akhir
atau endpoint netralisasi ditentukan
sebagai titik akhir 50% dari serum yang menghambat infeksi SARS-CoV-2 dengan
pengamatan adanya CPE dari sel yang diinokulasi.
Sampel serum diagnostik dari kasus indeks (index case) dan tiga kontak dekat asimptomatiknya dipelajari dengan
uji MN. Selama fase akut infeksi, tidak terdeteksi
adanya netralisasi antibodi. Pasien
serokonversi untuk menetralkan antibodi antara Hari ke 4 dan 9, dengan titer
meningkat menjadi 160 pada Hari 20 (Tabel). Spesimen serum dipastikan tidak toksik
atau infektif pada sel.
Pada fase awal wabah COVID-19, kasus yang dikonfirmasi di
luar China sebagian besar diimpor di antara para pelancong dari Wuhan. [7]
Kasus pertama di Finlandia terdeteksi
pada 29 Januari 2020 di antara kasus impor pertama di Eropa. Kasus ini menunjukkan gejala ringan tanpa
pneumonia: pilek, mual, demam tinggi, batuk, kelemahan otot dan kelelahan.
Tidak ada peristiwa transmisi sekunder yang terdeteksi meskipun tindak lanjut
aktif oleh Rumah Sakit distrik Lapland dan THL.
Pada 17 Maret 2020, 358 kasus COVID-19 tambahan yang
dikonfirmasi di laboratorium telah terdeteksi di Finlandia. Banyak dari mereka yang terkait dengan
perjalanan (kebanyakan dari Italia utara dan Austria) tetapi ada juga transmisi
lokal dari kasus terkait perjalanan. Risiko penularan infeksi COVID-19 komunitas
nasional yang luas di Uni Eropa, Wilayah Ekonomi Eropa atau EU dan Inggris
dalam beberapa minggu mendatang dianggap tinggi oleh Pusat Pencegahan dan
Pengendalian Penyakit atau European Centre for Disease Prevention and Control. [8]
Urutan genom virus pasien hampir identik dengan jenis
referensi dari Wuhan, mencerminkan impor awal dari Tiongkok. Kemudian informasi urutan genom di Finlandia
(hingga 2 Maret) menunjukkan pengelompokan dengan strain yang beredar di Italia
(lihat nextstrain.org/ncov).[9]
Pedoman saat ini dari Organisasi Kesehatan Dunia (WHO) untuk
pengujian COVID-19 merekomendasikan pengumpulan sampel serum akut dan pemulihan
dari pasien untuk pengujian serologis, yang dapat mendukung identifikasi respon
imun terhadap patogen virus tertentu.[10] Asam nukleat SARS-CoV-2 telah ditemukan juga
dalam cairan anal dan darah, [11] namun dalam penelitian ini tidak
mendeteksinya dalam sampel serum dalam kasus ini. Sampai saat ini, hanya data
terbatas yang tersedia pada respon antibodi selama infeksi SARS-CoV-2. [11,12]
Penelitian lebih lanjut diperlukan untuk
lebih memahami seroprevalensi antibodi terhadap berbagai coronavirus dalam
populasi dan peran antibodi ini dalam risiko penyakit.
Sesuai dengan temuan sebelumnya [11], kami
menemukan bahwa titer IgM dan IgG rendah atau tidak terdeteksi pada Hari ke 4
(hari kedua setelah masuk ke rumah sakit) namun meningkat pada Hari ke 9-10,
yaitu 5-6 hari setelah pengambilan sampel pertama. Menggunakan metode deteksi
lain di luar IFA serta antigen rekombinan dan menganalisis sampel dari sejumlah
besar pasien akan menjelaskan lebih lanjut tentang hal ini. Waktu kemunculan
pertama antibodi anti-SARS-CoV berkisar dari Hari ke 3 hingga 42 dan Hari ke 5
hingga 47 masing-masing untuk antibodi IgM dan IgG. [13]
Western
Blotting (WB) dari
sampel serum yang dikumpulkan pada masa pemulihan menunjukkan respons yang
menonjol terhadap protein N dan S, menegaskan peran protein tersebut sebagai
target diagnostik kandidat utama untuk tes antibodi. Namun, serum pasien tampaknya mengenali juga
protein E dan protein S1 dan S2 yang diproses. Meskipun WB mendeteksi epitop
linier utama, respon antibodi yang kuat terhadap protein S berkorelasi baik
dengan hasil uji MN.
Pemantauan rekasi-ikatan antibodi disarankan menjadi
metode yang lebih sensitif daripada mengukur fungsi antibodi netralisasi untuk
deteksi serologis infeksi human coronavirus (hCoV).[14] Namun, sampel hCoV OC43 dan 229E juga dapat
bereaksi silang dengan pengujian ELISA SARS-CoV [15]. Tes MN
berbasis SARS-CoV-2 CPE menggunakan virus hidup tampaknya sangat spesifik,
sementara sulit untuk melakukan karena membutuhkan laboratorium BSL-3. Peningkatan
setidaknya 4 kali lipat dalam netralisasi antibodi yang menunjukkan respons
positif terdeteksi pada Hari ke 9-10 setelah gejala pertama dan pada Hari ke 20,
tingkat antibodi masih meningkat. Temuan kami menunjukkan bahwa uji MN spesifik
untuk antibodi fungsional SARS-CoV-2 dan dapat diterapkan dalam pengawasan
kekebalan populasi untuk virus ini. Uji ini dapat digunakan sebagai alat
konfirmasi untuk spesifisitas SARS-CoV-2 dalam pengembangan alat diagnostik
yang lebih mudah diakses seperti tes berdasarkan deteksi binding antibodies. Studi sebelumnya pada pasien dengan infeksi
SARS-CoV menunjukkan bahwa waktu rata-rata untuk serokonversi adalah 20 hari,
saat itu 60-75% pasien memiliki IgG terhadap virus. [13,16] Antibodi
IgM dan IgG hadir dalam waktu 2 minggu sejak timbulnya gejala dalam penelitian ini
menunjukkan bahwa pasien yang baru sembuh mungkin merupakan sumber antibodi
terapeutik yang sesuai. [17] Sesuai
dengan temuan ini, laporan pracetak baru-baru ini pada pasien yang dirawat di
rumah sakit dengan infeksi SARS-CoV-2 yang dikonfirmasi di Tiongkok menunjukkan
bahwa waktu rata-rata untuk serokonversi adalah 11-14 hari, tergantung pada uji
imunologis yang digunakan.[18]
Tidak terdapat netralisasi antibodi SARS-CoV-2 yang
terdeteksi pada sampel yang kontak dekat maupun sampel populasi kontrol yang
dikumpulkan selama 2019 di Finlandia. Prevalensi rendah (0,21%) antibodi
terhadap koronavirus Middle East
Respiratory Syndrome dilaporkan pada populasi umum Qatar.[19] Sebuah meta-analisis seroprevalensi untuk
SARS-CoV di antara populasi manusia yang berbeda menghasilkan seroprevalensi
rendah secara keseluruhan (0,10%), meskipun sedikit lebih tinggi (0,23%) di
antara petugas kesehatan dan orang lain yang memiliki kontak dekat dengan
pasien SARS. [20] Ikatan dan netralisasi
antibodi HCoV ditemukan lebih tinggi pada orang dewasa yang lebih tua.[14]
Total 97% dan 99% sampel serum dari orang
dewasa yang sehat masing-masing memiliki antibodi terhadap HCoV-229E dan
HCoV-OC43,[21] dan 75% dan
65% dari anak-anak dalam kelompok usia 2,5-3,5 tahun ditemukan menjadi
seropositif masing-masing terhadap HCoV-NL63 dan HCoV-229E [22].
Sementara telah disarankan bahwa keterlambatan
serokonversi pada kebanyakan pasien SARS mengurangi nilai uji serologis selama
inkubasi dan fase awal SARS,[13] pengujian serologis disarankan untuk
konfirmasi infeksi SARS-CoV-2. [11] Setelah memahami dengan baik kinetika,
spesifisitas, dan sensitivitas uji dalam pengembangan uji serologis
dapat membantu pelacakan kontak dalam suatu kluster dan bisa berperan dalam mendiagnosis
infeksi SARS-CoV-2 akut dan yang sudah berlalu.
Daftar
Pustaka
1. World Health Organization (WHO).
Novel Coronavirus (2019-nCoV) Situation report - 1. Geneva: WHO, 21 Jan 2020.
Available from: https://www.who.int/docs/default-source/coronaviruse/situation-reports/20200121-sitrep-1-2019-ncov.pdf
2. Corman VM, Landt O, Kaiser M, Molenkamp R, Meijer A, Chu DKW,
et al. Detection of 2019 novel coronavirus (2019-nCoV) by real-time
RT-PCR. Euro Surveill. 2020;25(3). https://doi.org/10.2807/1560-7917.ES.2020.25.3.2000045 PMID:
31992387
3. Wu F, Zhao S, Yu B, Chen YM, Wang W, Song ZG,
et al. A new coronavirus associated with human respiratory disease in
China. Nature. 2020;579(7798):265-9. https://doi.org/10.1038/s41586-020-2008-3 PMID:
32015508
4. Korzyukov Y, Hetzel U, Kipar A, Vapalahti O, Hepojoki J. Generation
of anti-boa immunoglobulin antibodies for serodiagnostic applications, and
their use to detect anti-reptarenavirus antibodies in boa constrictor. PLoS
One. 2016;11(6):e0158417. https://doi.org/10.1371/journal.pone.0158417 PMID:
27355360
5. Mäkelä MJ, Puhakka T, Ruuskanen O, Leinonen M, Saikku P, Kimpimäki M,
et al. Viruses and bacteria in the etiology of the common cold. J
Clin Microbiol. 1998;36(2):539-42. https://doi.org/10.1128/JCM.36.2.539-542.1998 PMID:
9466772
6. Ziegler T, Matikainen S, Rönkkö E, Osterlund P, Sillanpää M, Sirén J,
et al. Severe acute respiratory syndrome coronavirus fails to activate
cytokine-mediated innate immune responses in cultured human monocyte-derived
dendritic cells. J Virol. 2005;79(21):13800-5. https://doi.org/10.1128/JVI.79.21.13800-13805.2005 PMID:
16227300
7. Backer JA, Klinkenberg D, Wallinga J. Incubation
period of 2019 novel coronavirus (2019-nCoV) infections among travellers from
Wuhan, China, 20-28 January 2020. Euro Surveill. 2020;25(5). https://doi.org/10.2807/1560-7917.ES.2020.25.5.2000062 PMID:
32046819
8. European Centre for Disease
Prevention and Control (ECDC). Novel coronavirus disease 2019 (COVID-19)
pandemic: increased transmission in the EU/EEA and the UK – sixth update.
Stockholm: ECDC, 12 Mar 2020. Available from: https://www.ecdc.europa.eu/en/publications-data/rapid-risk-assessment-novel-coronavirus-disease-2019-covid-19-pandemic-increased
9. Hadfield J, Megill C, Bell SM, Huddleston J, Potter B, Callender C,
et al. Nextstrain: real-time tracking of pathogen
evolution. Bioinformatics. 2018;34(23):4121-3. https://doi.org/10.1093/bioinformatics/bty407 PMID:
29790939
10.World Health
Organization (WHO). Laboratory testing for 2019 novel coronavirus (2019-nCoV)
in suspected human cases. ISBN 978-92-4-000097-1. Geneva: WHO; 17 Jan 2020.
Available from: https://www.google.com/url?sa=t&rct=j&q=&esrc=s&source=web&cd=1&ved=2ahUKEwiOw-i44ZLoAhWWFcAKHZmJCIoQFjAAegQIBBAB&url=https%3A%2F%2Fapps.who.int%2Firis%2Frest%2Fbitstreams%2F1266309%2Fretrieve&usg=AOvVaw1YNVgNwua9Dpj5c-PSD5c8
11.Zhang W, Du RH, Li B, Zheng XS, Yang XL, Hu B,
et al. Molecular and serological investigation of 2019-nCoV infected
patients: implication of multiple shedding routes. Emerg Microbes
Infect. 2020;9(1):386-9. https://doi.org/10.1080/22221751.2020.1729071 PMID:
32065057
12. Bai SL, Wang JY, Zhou YQ, Yu DS, Gao XM, Li LL,
et al. [Analysis of the first cluster of cases in a family of novel
coronavirus pneumonia in Gansu Province]. Zhonghua Yu Fang Yi Xue Za
Zhi. 2020;54(0):E005. Chinese. PMID:
32064855
13. Chen X, Zhou B, Li M, Liang X, Wang H, Yang G,
et al. Serology of severe acute respiratory syndrome: implications for
surveillance and outcome. J Infect Dis. 2004;189(7):1158-63. https://doi.org/10.1086/380397 PMID:
15031782
14. Gorse GJ, Donovan MM, Patel GB. Antibodies
to coronaviruses are higher in older compared with younger adults and binding
antibodies are more sensitive than neutralizing antibodies in identifying
coronavirus-associated illnesses. J Med
Virol. 2020;92(5):512-7. https://doi.org/10.1002/jmv.25715 PMID:
32073157
15. Woo PC, Lau SK, Wong BH, Chan KH, Hui WT, Kwan GS,
et al. False-positive results in a recombinant severe acute respiratory
syndrome-associated coronavirus (SARS-CoV) nucleocapsid enzyme-linked immunosorbent
assay due to HCoV-OC43 and HCoV-229E rectified by Western blotting with
recombinant SARS-CoV spike polypeptide. J Clin
Microbiol. 2004;42(12):5885-8. https://doi.org/10.1128/JCM.42.12.5885-5888.2004 PMID:
15583332
16.Peiris JSM, Chu CM, Cheng VCC, Chan KS, Hung IFN, Poon LLM,
et al. Clinical progression and viral load in a community outbreak of
coronavirus-associated SARS pneumonia: a prospective study. Lancet. 2003;361(9371):1767-72. https://doi.org/10.1016/S0140-6736(03)13412-5 PMID:
12781535
17. Chen L, Xiong J, Bao L, Yuan S. Convalescent
plasma as a potential therapy for COVID-19. The Lancet Infectious Diseases.
Available online 27 February 2020.Forthcoming. https://doi.org/10.1016/S1473-3099(20)30141-9
18.Zhao J, Yuan Q,
Wang H, Liu W, Liao X, Su Y et al. Antibody responses to SARS-CoV-2 in patients
of novel coronavirus disease. Pre-print. 2019medRxiv 2020.03.02.20030189.
20.Leung GM, Lim WW, Ho LM, Lam TH, Ghani AC, Donnelly CA,
et al. Seroprevalence of IgG antibodies to SARS-coronavirus in
asymptomatic or subclinical population groups. Epidemiol Infect. 2006;134(2):211-21. https://doi.org/10.1017/S0950268805004826 PMID:
16490123
21. Che XY, Qiu LW, Liao ZY, Wang YD, Wen K, Pan YX,
et al. Antigenic cross-reactivity between severe acute respiratory
syndrome-associated coronavirus and human coronaviruses 229E and OC43. J
Infect Dis. 2005;191(12):2033-7. https://doi.org/10.1086/430355 PMID: 15897988
22. Dijkman R, Jebbink MF, El
Idrissi NB, Pyrc K, Müller MA, Kuijpers TW,
et al. Human coronavirus NL63 and 229E seroconversion in children. J
Clin Microbiol. 2008;46(7):2368-73. https://doi.org/10.1128/JCM.00533-08 PMID:
18495857
23. Wu XD, Shang B, Yang RF, Yu H, Ma ZH, Shen X,
et al. The spike protein of severe acute respiratory syndrome (SARS) is
cleaved in virus infected Vero-E6 cells. Cell
Res. 2004;14(5):400-6. https://doi.org/10.1038/sj.cr.7290240 PMID:
15450134
Sumber:
Serological and molecular findings during SARS-CoV-2
infection: the first case study in Finland, January to February 2020. Eurosurveillance.
European Journal on Infectious Disease Surveilance, Epidemiology, Prenvention
and Control. https://www.eurosurveillance.org/content/10.2807/1560-7917.ES.2020.25.11.2000266. Diunduh tanggal 26 Maret 2020 jam 09:30.
No comments:
Post a Comment