Persyaratan Vaksin PMK

 

 

Persyaratan Standar ASEAN untuk vaksin penyakit mulut dan kuku bagi sapi dan kerbau, inaktif

 

I. PERSYARATAN SEED VIRUS DAN PRODUKSI SUBSTRAT

 

1. VIRUS BENIH (SEED VIRUS)

 

Master seed virus harus dipilih berdasarkan kemudahan pertumbuhan dalam kultur sel atau epitel lidah sapi, hasil virus, stabilitas, spektrum antigenik yang luas dan sesuai dengan kepentingan epidemiologi dari setiap varian. Itu harus ditandai dan didistribusikan oleh laboratorium berwenang resmi di daerah di mana laboratorium tersebut ada. Virus harus memenuhi uji sterilitas, keamanan kemurnian, dan potensi sebelum digunakan untuk produksi vaksin. Master dan working seed virus diproduksi di sel primer atau cell lines dalam sistem lot benih. Virus benih harus disimpan pada suhu rendah (mis. -70°C) atau dibekukan.

 

2. SUBSTRAT PRODUKSI

 

Suspensi atau sel monolayer atau epitel lidah sapi yang digunakan selama produksi vaksin harus bebas dari agen sitopatogenik dan haemadsorbing.

 

II. PERSYARATAN PENGENDALIAN KUALITAS

1. UJI STERILITAS

 

Sampel wadah akhir harus diuji untuk tidak adanya bakteri, Mycoplasma dan jamur dengan metode yang muncul sebagai Lampiran 2. Pengujian Mycoplasma dapat dilakukan dalam sampel massal.

 

2. UJI KEMURNIAN

 

Sampel dari Bulk (wadah curah) harus diuji untuk tidak adanya agen sitopatogenik dan haemadsorbing dan antibodi terhadap protein nonstruktural.

 

3. UJI INAKTIVASI

 

Tes inaktivasi adalah tes dalam proses yang harus dilakukan untuk setiap batch antigen. Setelah inaktivasi, sampel dari setiap batch antigen inaktif yang mewakili setidaknya 200 dosis harus diuji untuk bebas dari infeksi virus dengan inokulasi kultur sel monolayer yang sensitif, sebaiknya dari asal yang sama seperti yang digunakan untuk produksi antigen. Mungkin lebih baik untuk mengkonsentrasikan antigen untuk melakukan ini, dalam hal ini harus ditunjukkan bahwa bahan yang dikonsentrasikan tidak mengganggu sensitivitas atau pembacaan penetapan kadar. Lembar sel diperiksa setiap hari selama 2-3 hari, setelah itu media bekas dipindahkan ke sel monolayer baru dan monolayer asli diisi ulang dengan media segar. Dengan menggunakan metode ini, jejak virus hidup dapat diperkuat dengan prosedur pasase dan dideteksi berdasarkan CPE yang diamati. Setidaknya tiga bagian dari persiapan virus asli yang biasa digunakan. Varian dari metode ini adalah dengan membekukan-mencairkan monolayer lama untuk melepaskan virus intraseluler, yang dapat dideteksi pada pasase selanjutnya.

 

4. UJI KEAMANAN

 

Sampel wadah akhir harus diuji sebagai berikut:

4.1. Untuk registrasi vaksin

Setidaknya delapan sapi dari daerah bebas PMK dengan usia minimum yang dimaksudkan untuk vaksin, harus digunakan. Jika tidak tersedia dari daerah bebas PMK, ternak seronegatif PMK dapat digunakan. Setiap sapi diinokulasi dengan rute pemberian yang direkomendasikan dengan satu dosis dan 14 hari setelah penyuntikan pertama ulangi dengan 2 dosis vaksin dengan rute yang direkomendasikan. Uji dosis ulang harus sesuai dengan jadwal vaksinasi primer (misalnya dua suntikan) ditambah vaksinasi pertama (yaitu total tiga suntikan). Ternak diamati untuk tanda klinis reaksi lokal dan sistemik terhadap vaksinasi selama setidaknya 14 hari setelah setiap injeksi. Vaksin dianggap memuaskan jika tidak ada hewan yang menunjukkan tanda-tanda klinis PMK, reaksi lokal dan sistemik abnormal yang disebabkan oleh vaksin.

 

4.2. Untuk rilis batch produk akhir

Untuk tujuan pelepasan batch, setidaknya dua sapi sehat, tidak kurang dari 6 bulan, dari daerah bebas PMK harus digunakan jika tidak tersedia dari daerah bebas PMK, sapi seronegatif PMK dapat digunakan. Hewan sasaran diinokulasi melalui rute pemberian yang direkomendasikan dengan setidaknya dua dosis vaksin. Hewan-hewan tersebut diamati reaksi vaksinasi lokal dan sistemik selama tidak kurang dari 14 hari. Vaksin memenuhi pengujian jika tidak ada hewan yang menunjukkan tanda-tanda penyakit yang mencolok atau mati karena penyebab yang disebabkan oleh vaksin.

 

5. UJI POTENSI

Sampel bulk (wadah curah) atau akhir harus diuji dengan salah satu metode berikut :

 

5.1. Tes PD₅₀:

Sapi dengan seronegatif PMK yang berumur minimal 6 bulan, yang sebelumnya belum pernah divaksinasi PMK harus digunakan. Tiga kelompok dengan tidak kurang dari lima ekor sapi per kelompok harus divaksinasi dengan rute yang direkomendasikan oleh produsen. Vaksin harus diberikan pada dosis yang berbeda per kelompok dengan menyuntikkan volume vaksin yang berbeda. Misalnya, jika label menyatakan bahwa injeksi 2 ml sesuai dengan pemberian 1 dosis vaksin, dosis vaksin 1/4 akan diperoleh dengan injeksi 0,5 ml, dan dosis 1/10 akan diperoleh dengan injeksi 0,2 ml. Hewan-hewan ini dan kelompok kontrol dari dua hewan yang tidak divaksinasi ditantang baik 3 minggu (berair) atau hingga 4 minggu (minyak) setelah vaksinasi dengan suspensi virus bovine yang sepenuhnya mematikan dan sesuai dengan jenis virus dalam vaksin di bawah uji dengan menginokulasi setara dengan total 10.000 BID₅₀ (50% dosis infeksi sapi) secara intradermal ke dalam dua tempat di permukaan atas lidah (0,1 ml per tempat). Hewan diamati setidaknya selama 8 hari. Hewan yang tidak terlindungi menunjukkan lesi di tempat selain lidah. Hewan kontrol harus mengembangkan lesi setidaknya pada tiga kaki. Dari jumlah hewan yang terlindungi pada masing-masing kelompok, dihitung kandungan PD₅₀ vaksin tersebut. Ada berbagai metode untuk menghitung PD₅₀, tetapi prosedur berdasarkan metode Kärber umumnya lebih disukai saat menginterpretasikan estimasi PD₅₀ yang dihitung dengan cara ini. Vaksin harus mengandung setidaknya 3 PD₅₀ per dosis untuk sapi.

 

5.2. Tes PGP (persentase perlindungan terhadap infeksi kaki umum):

Untuk metode ini, sekelompok 16 ekor sapi seronegatif FMD dengan usia minimal 6 bulan, dengan karakteristik yang sama yang dijelaskan untuk uji PD₅₀, divaksinasi dengan dosis sapi dengan rute dan volume yang direkomendasikan oleh produsen. Hewan tersebut dan kelompok kontrol dari dua hewan yang tidak divaksinasi ditantang 4 minggu atau lebih setelah vaksinasi dengan strain tantangan, yaitu suspensi virus bovine yang sepenuhnya virulen dan sesuai dengan jenis virus dalam vaksin yang diuji dengan menginokulasi total 10.000 BID₅₀, secara intradermal ke setidaknya dua tempat di permukaan atas lidah. Hewan yang tidak dilindungi menunjukkan lesi di tempat selain lidah dalam waktu 7 hari setelah inokulasi. Hewan kontrol harus memperlihatkan lesi setidaknya pada tiga kaki; vaksin harus melindungi setidaknya 12 ekor hewan dari 16 ekor  yang divaksinasi. Hewan diamati pada 7-8 hari setelah tantangan.

 

5.3. Standar pengujian potensi adalah tes tantangan:

Untuk pengujian pelepasan batch tidak langsung dapat digunakan untuk pertimbangan kesejahteraan hewan, selama korelasi telah divalidasi dengan persentase perlindungan pada hewan target. Tes potensi tidak langsung yang sering termasuk titrasi antibodi setelah vaksinasi spesies target. Idealnya, uji tidak langsung dilakukan untuk setiap galur untuk satu spesies dan setiap formulasi vaksin untuk menetapkan korelasi antara hasil uji tidak langsung dan efikasi vaksin.

 

III. PERSYARATAN LAINNYA

Vaksin harus memenuhi Persyaratan Umum Vaksin Hewan yang tercantum dalam Lampiran 4.

SUMBER:

Lampiran 7-14 Pertemuan ANFPAV.

https://karantina.pertanian.go.id/fileman/Uploads/Documents/SPS/App_9_Proposed_revision_FMD_Vacc.pdf